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2021-12-01
分子实验外包-高通量测序流程和原理(高通量基因测序技术)
高通量测序技术又称二代测序技术,与一代测序技术相比,二代测序技术可以更低的成本提供更高通量的数据。目前三代测序技术已经诞生。1.一代测序技术一代测序技术以Sanger法为代表。Sanger法又叫作双脱氧链终止法,它以DNA合成反应为基础。Sanger法测定DNA序列的原理如图3-2所示。首先,在每个反应体系中加入同位
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2021-11-30
细胞实验外包-细胞增殖检测方法(细胞增殖包括什么过程)
细胞增殖是生物体的重要生命特征。细胞在辐照等外界刺激或给药处理的情况下,会产生细胞毒作用,其生长情况会受到影响,同时,细胞的活性也会受到相应的影响。检测细胞增殖及活性变化情况则可以很好的反映细胞的生长状态及外界刺激的细胞毒作用情况。细胞增殖的研究方法有很多,以下内容为细胞增殖检测方法的总结。
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2021-11-30
细胞实验外包-如何提取外泌体(细胞外泌体提取)
外泌体(exosome)是是一种能被大多数细胞分泌的微小膜泡,这种微小膜泡中含有细胞特异的蛋白、脂质和核酸,能作为信号分子传递给其他细胞从而改变其他细胞的功能。从细胞中提取外泌体后可以通过透射电镜来分析exosome的大小、形态等,再经过Western Blot可以分析特定蛋白在exosome中的表达情况。外泌体中的蛋白、RNA
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2021-11-29
细胞实验外包-流式细胞术是如何工作的?
流式细胞术是一种能够测量异源群体中单个粒子(细胞)特性的技术。这使研究人员能够根据这些特性对每个细胞进行表型分析,并且在某些情况下还可以将细胞分类为不同的亚群,以便在称为荧光激活细胞分选 (FACS) 的专门流式细胞术中进行进一步评估。在流式细胞仪中,悬浮细胞被压入“单一文件”,然后通过激光,从而能够
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2021-11-29
细胞实验外包-研究细胞活力和细胞凋亡的实验方案
研究细胞活力和细胞凋亡的实验方案1、贴壁细胞:去除培养基并用 PBS 洗涤细胞单层添加解离剂(例如胰蛋白酶)并在 37°C 下孵育 5 分钟或直至细胞从细胞培养皿中分离。添加含血清培养基或胰蛋白酶抑制剂以灭活解离剂。将细胞转移到微量离心管中。悬浮细胞:将细胞转移到微量离心管中。2、通
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2021-11-28
细胞实验外包-诱导细胞凋亡的通用方案
诱导细胞凋亡可以通过多种方法在实验系统中诱导细胞凋亡,包括:用蛋白质合成抑制剂茴香霉素或 DNA 拓扑异构酶 I 抑制剂喜树碱处理细胞会诱导人早幼粒细胞系 HL-60 的细胞凋亡(Del Bino等, 1991;Li等, 1995;Gorczyca等, 1993; Darzynkiewicz等人,1992 年)。生长因子的撤除诱导生长因子依赖性细胞系的
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2021-11-28
细胞实验外包-Jurkat 细胞凋亡检测方法
Jurkat 细胞凋亡检测方法所需材料:CaspACE™ FITC-VAD-FMK 原位标记(Cat.# G7461、G7462)聚-L-赖氨酸包被的载玻片anti-Fas mAb(Clone CH-11 MBL International Cat.# SY-100)PBS福尔马林安装介质荧光显微镜1、将 Jurkat 细胞以 1 × 10 5细胞/ml 接种并在 RPMI-1640 + 10% FB
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2021-11-27
细胞实验-细胞凋亡研究的临床应用
许多疾病——癌症、自身免疫性疾病和神经退行性疾病,包括阿尔茨海默氏症亨廷顿氏症和 ALS——要么是细胞凋亡未能消除有害细胞,要么是细胞凋亡的不当激活导致必需细胞的丢失。凋亡调控的复杂性和凋亡信号通路中的大量分子参与者为开发调节该通路的疗法提供了充足的机会。潜在的治疗策略包括抑制或激活参与该途径的特
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2021-11-27
细胞实验-生物和化学诱导细胞凋亡
可以通过多种方法在实验系统中诱导细胞凋亡。一般来说,诱导细胞凋亡的方法可分为生物诱导和化学诱导两大类。细胞凋亡诱导生物Fas或 TNF 受体通过各自的配体激活,或通过与激动剂抗体交联,诱导携带 Fas 或 TNF 受体的细胞凋亡。在这里,我们描述了在 Jurkat 细胞中使用抗 Fas 受体(抗 CD95)单克隆抗体(mA
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