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细胞实验外包-流式细胞术是如何工作的?

2021-11-29 10:34:53
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  流式细胞术是一种能够测量异源群体中单个粒子(细胞)特性的技术。这使研究人员能够根据这些特性对每个细胞进行表型分析,并且在某些情况下还可以将细胞分类为不同的亚群,以便在称为荧光激活细胞分选 (FACS) 的专门流式细胞术中进行进一步评估。在流式细胞仪中,悬浮细胞被压入“单一文件”,然后通过激光,从而能够测量颗粒大小和粒度。通过使用与细胞表面或细胞内的靶蛋白结合的荧光偶联抗体进行进一步的表型分析,从而能够将荧光强度的测量作为另一个参数。

  流式细胞术是如何工作的?

  1.   首先,细胞悬浮液流过腔室,然后通过流体系统将其分离成单细胞流。

  2. 然后溶液通过一束激光或一组激光(图 1 – 流式细胞术概览)。

  3.   一组透镜、滤光片和分色镜用于收集和分离光线。

  4. 以 90 度角(侧向散射 - SSC)和细胞流的正对面(前向散射 - FSC)收集光。

  5. 使用光电二极管或光电倍增管 (PMT) 检测光。

  除了这些固有的物理特性外,标记的荧光也可以类似的方式进行分析。一些流式细胞仪还可以根据这些属性的用户门控条件对细胞进行分类。这种类型的流式细胞术通常称为荧光激活细胞分选 (FACS)。

流式细胞术概述

  图  - 流式细胞术概述

  流式细胞术应用

  质膜受体表达分析

  细胞活力、细胞凋亡和坏死的分析

  细胞表型

  细胞周期分析

  细胞分选

  细胞内蛋白表达分析

  生物标志物检测

  细胞计数

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