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2025-03-19
IP、CO-IP、Pull-down的区别与应用
一、免疫沉淀(IP)免疫沉淀技术是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础,用于研究蛋白质相互作用、蛋白质与遗传物质之间相互作用的经典方法,可有效确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用,也是用于抗原检测和纯化的方法之一。CO-IP、CHIP、RIP等技术由IP演化而来。【原理】IP利用特定抗体与目标蛋白
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2025-03-17
中科院1区9.1分!“血管生成+脑卒中”思路新高度!中国药科大学孔令义/张超团队带来脑卒中治疗新方向→
血管生成又称为血管新生,是指新血管从已存在的血管中形成的生物过程。这一过程对于组织修复、生长以及在某些疾病状态如癌症中的病理改变中扮演着关键角色。那么关于血管生成有什么课题设计思路呢?今天我们一起来探讨一下。今天我们将分享一篇发表于中科院1区期刊Pharmacological Research,影响因子为9.1的文献,希望能给
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2025-03-14
干货 | 11种蛋白质测定法汇总
一、电泳法1.原理:指带电荷的供试品(如蛋白质、核苷酸等)在惰性支持介质(如滤纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶等)中,在电场的作用下,向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动,由于名组分之间的移动速度不同,使各组分分离成狭窄的区带,并用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其百分含量。2.优
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2025-03-12
超详细的免疫组化常见问题及建议
免疫组化(简称IHC)是一种利用特异性抗体与抗原结合的原理,通过特定的显色反应来检测组织或细胞中的特定化学成分或性质的组织化学技术。这种技术通过显微镜观察颜色变化,以确定抗原-抗体结合的位置。实验流程主要包括以下步骤:切片制作(固定,脱水,透明,包埋,切片,贴片,烤片),脱蜡,水化,阻断,抗原修复
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2025-03-10
5种常用的RNA连接酶,你都了解吗?
一、T4 RNA Ligase1(ssRNA Ligase)作用:是一种ATP依赖的可以催化ssRNA、ssDNA、单核苷酸分子间或分子内5'-P末端与3'-0H末端之间形成磷酸二酯键的酶。特点:主要用于RNA和RNA之间的连接,连接时需要5'磷酸基团和3'羟基的存在;也可以用于RNA和单核苷酸之间的连接,单核苷酸必须为5'和3
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2025-03-07
7种DNA连接酶的作用及特点
DNA连接酶是生物体内重要的酶,其所催化的反应在DNA的复制和修复过程中起着重要的作用。今天我们就来了解一下这7种分子生物学实验中常见的DNA连接酶吧!一、T4 DNA Ligase作用:主要连接平末端或粘性末端,并修复双链DNA和一些DNA/RNA杂交体中的单链缺口,在5'磷酸基和3'羟基之间形成
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2025-03-05
制备单细胞悬液常用消化酶汇总
组织由细胞和细胞外基质(ECM)有序而紧密地联结在一起。从组织中获取单细胞悬液,应用于流式检测、单细胞测序、体外培养药物筛选、细胞移植、类器官培养等方面,更接近体内的天然状态,具有很多优势。要想获得高品质的单细胞悬液,需要采取一些有效措施,其中,酶消化法就是一种既能维持细胞的最佳状态、又能有效地获
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2025-03-03
“细胞自噬+糖尿病”巧妙思路拿下中科院1区14.6分!南京医科大学韩晓/陈芳团队提出抗糖尿病的新见解
细胞自噬,简单的说,就是细胞“自己吃自己”,是真核生物中进化保守的对细胞内物质进行周转的重要过程。那么关于细胞自噬有什么课题设计思路呢?今天我们一起来探讨一下。今天我们将分享一篇发表于中科院1区期刊Autophagy,影响因子为14.6的文献,希望能给大家带来不一样的灵感。一、课题挂靠与SCI信息【文章题目】:儿茶素
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2025-02-28
涉及蛋白质磷酸化的14条信号通路汇总
一、信号通路分类1.生长因子与细胞增殖相关通路(1)Ras/MAPK通路:调控细胞增殖、分化、存活(2)PI3K/Akt/mTOR通路:促进细胞存活、代谢和生长(3)Wnt/β-catenin通路:调控胚胎发育、干细胞维持2.细胞应激与凋亡相关通路(1)DNA损伤应答(ATM/ATR通路):修复DNA损伤或启动凋亡(2)JNK/p38 MAPK通路:响
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