• DAB染色液的使用方法及注意事项

    DAB染色液的使用方法及注意事项

    DAB染色液用于免疫组化染色,应用在Dako 自动染色系统上。一、DAB染色液的使用方法⒈DAB显色液配制10mM Tris-HCl (pH7.6) 9mL +DAB (diaminobezidin 3,3-二氨基联苯胺) +0.3%(W/V) NiCl2 或CoCl2 1mL ,显色时加入5-10mL 30%H2O2 混匀后立即使用⒉显色准备好含有待测蛋白的固相膜:包括电泳、转印...

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  • 大肠菌群平板计数法的注意事项

    大肠菌群平板计数法的注意事项

    大肠菌群是经常用来衡量食品卫生情况的重要指标,绝大部分食品都会要求检测的项目。在食品微生物实验室里,大肠菌群和菌落总数的检测频次应该是最高的,但检测过程中总会有一些小问题困扰着大家,以下来讲解一下大肠菌群平板计数法的注意事项。一、方法的选择相比于MPN计数法,平板计数法更适用于大肠菌群含量较...

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  • 细胞冻存冷冻保存方法及详细步骤

    细胞冻存冷冻保存方法及详细步骤

    细胞越来越受广大科研者的喜爱,但细胞不像人们想象中那么强大,在培养复苏等过程中稍有不慎就不可能导致它的死亡。而且它必须是是在无污染的条件下培养,复苏才能保证实验效果。下面小编为您详细总结细胞的正确冷冻保存方法、保存详细步骤,相关注意事项如下:一、保存方法(主要有两个):(1)传统方法:冷存...

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  • 细胞瞬时转染的步骤、原理,及血球计数板对细胞计数的原理和方法

    细胞瞬时转染的步骤、原理,及血球计数板对细胞计数的原理和方法

    哺乳动物细胞瞬时转染能在短期内快速表达高活性蛋白而被广泛应用。本文主要介绍了细胞瞬时转染的步骤、原理,及血球计数板对细胞计数的原理和方法。哺乳动物细胞自身具有蛋白折叠和翻译后修饰的功能,获得的蛋白更具有天然活性。哺乳动物细胞生产蛋白的方式有两种:瞬时转染和稳定转染。瞬时转染的特点是短期快速表...

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  • 质粒提取实验会遇到哪些问题(质粒提取实验避坑指南)

    质粒提取实验会遇到哪些问题(质粒提取实验避坑指南)

    相信大部分同学进入实验室第一接触的实验就是质粒提取,虽然质粒提取实验相对简单,但是还是有很多问题需要我们提防和解决的。质粒提取实验会遇到哪些问题(质粒提取实验避坑指南)质粒是携带外源基因进入细菌中扩增或者表达的重要媒介,常用的方法有煮沸裂解法、碱提法等。而我们常用的 kit 是采用碱提法。不同...

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  • 稳转株构建方法?影响稳转株建立的因素有哪些

    稳转株构建方法?影响稳转株建立的因素有哪些

    什么是稳转株?稳转株即稳定表达的细胞株,指基于某一细胞系构建的持续过表达或干扰某特定基因的细胞系。为什么要建立稳转株?① 通过建立稳转细胞系,可以降低频繁转染或者病毒包装的成本,方便在目的细胞中研究基因功能实验研究;② 区别于瞬时转染只能干扰表达,无法去除已表达的目的蛋白,构建稳转...

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  • 细胞计数板使用方法(细胞计数板法)

    细胞计数板使用方法(细胞计数板法)

    实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。 具体操作: 1. 将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板。 2. 将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间,静置3min,注意盖片下不要有气泡,...

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  • 怎么才能培养出符合条件的细胞?

    怎么才能培养出符合条件的细胞?

    一养细胞深似海,从此自由是路人。开始养细胞之前就要做好随时照顾它的心理准备,三天打鱼两天晒网不仅无法养出状态绝佳的细胞,还有可能让娇贵的细胞宝宝全军覆没,那么,怎么才能培养出符合条件的细胞呢?1、选择正确的培养基在养细胞之前,就要了解,你所养细胞的来源以及种类和名称,查阅一定量的文献,确定...

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  • 细胞培养需要哪些基本条件(5大基本条件汇总)

    细胞培养需要哪些基本条件(5大基本条件汇总)

    细胞培养需要哪些基本条件呢?小编汇总了五个,下面一起来了解一下吧!1.合适的细胞培养基培养基是维持体外细胞生存和生长的溶液,分为天然培养基和合成培养基。现在实验室一般都用的是合成培养基,合成培养基现已有DMEM,1640,IMDM,L15等,不同的细胞来使用不同种类的培养基,比如贴壁细胞大多都可以用DMEM来培...

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  • 动物实验中,怎么选择合适的缝针缝线?

    动物实验中,怎么选择合适的缝针缝线?

    在科研动物实验中,缝合操作很常见,但要减少组织损伤,达到最佳缝合效果,就需要根据但不同类型的组织,来选择合适的缝针缝线。具体该如何选择?一起来看。缝针选择标准足够的强度(硬度)尽可能细(越细对组织损伤越小)规格选择科研上,主要用到的缝针有三角针(棱针)和圆针以及铲针。这个...

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