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2022-03-23
什么是细胞自噬(什么情况下细胞会自噬)
自噬(autophagy=self-eating)意为自体吞噬,是真核细胞在自噬相关基因(autophagy related gene,Atg)的调控下利用溶酶体降解自身细胞质蛋白和受损细胞器的过程。自噬可防止细胞损伤,促进细胞在营养缺乏的情况下存活,并对细胞毒性刺激作出反应。自噬包括生理条件下的基础型自噬和应激条件下的诱导型自噬。前
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2022-03-23
自噬的发生与调控途径(细胞自噬的调控机制)
自噬的本质其实是细胞内的膜重排,其发生过程大体分为以下4个阶段:自噬的起始→ 隔离膜和自噬体的形成→ 自噬体与溶酶体融合→ 自噬体的裂解。图1. 自噬的发生过程(Li et al. Molecular Cancer, 2020)在自噬的发生过程中,有多种自噬相关蛋白可调节和控制自噬形成的不同阶段。迄今为止,科学家已在酵母中鉴定出
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2022-03-23
细胞铺板密度、血清、抗生素分别对转染有什么影响?
细胞铺板密度对转染的影响:转染试剂成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率和总的细胞数量就很重要,一般细胞数量较少时转染效率高,一些试剂由于本身毒性的影响,太低的细胞数量时毒性明显,所以会要求较高的细胞密度(汇合度),顺便说一句,看一个转染试剂的毒
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2022-03-22
线粒体自噬(什么是线粒体自噬)
细胞自噬既可以是非选择性的,如巨自噬和微自噬;也可以是选择性的,包括线粒体自噬,(mitophagy)、过氧化物酶体自噬(pexophagy)、内质网以及核糖体自噬等途径。非选择性自噬在细胞饥饿时发挥重要的作用,能为细胞提供氨基酸等以满足营养需要;选择性自噬则主要用于保护细胞的结构,在正常的情况下扮演“大扫除”(
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2022-03-22
LncRNAs的鉴定方法(lncrna是怎么产生的)
1. lncRNA阵列技术在lncRNAs研究的初期,新lncRNAs的发现主要是通过使用cDNA克隆和Sanger测序(FANTOM项目)或识别染色质特征(如K4-K36三甲基化标记的存在),以及以组织和细胞特异性的方式在基因组非编码区使用平铺微阵列来进行的。日本理研所的FANTOM项目通过生成和测序含有近60,770个全长cDNA的cDNA文库,首次提供了
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2022-03-22
LncRNAs的功能研究方法(lncrna研究思路机制)
1. RNA Interference (RNAi)传统的基因修饰涉及RNA干扰(RNAi)技术,如siRNA和shRNA常用于lncRNA功能研究。shRNA在转染能力上克服了siRNA的局限性,通过病毒载体引入shRNA可以使其稳定整合并长期敲除靶基因。同时,shRNA可被诱导并用于需要严格调控基因的功能研究。2. CRISPR/Cas9CRISPR工具可以通过直接突变
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2022-03-22
Molecular Therapy | IF11.454 揭示急性胰腺炎发病机制
急性胰腺炎(AP)是一种常见的消化系统疾病无特异性治疗,其发病机制我们至今仍未完全了解。近来,研究人员发现,在AP过程中,主要的SOCE通道在PACs中是转录后诱导的,而miR-26a的表达在实验组AP和人类AP中降低,并表现出与AP的严重程度相关。在机制上,miR-26a同时靶向Trpc3和Trpc6SOCE通道,并减弱生理和病理PACs中钙离
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2022-03-22
如何制备血清减量或无血清培养基(无血清培养液怎么配)
如何制备血清减量或无血清培养基(无血清培养液怎么配)材料基础营养培养基,如DMEM营养物质:无机盐,氨基酸,维生素微量元素添加剂:生长因子和激素,其他各种培养基成分(见表1)凭经验先选用特别适合某种细胞生长的培养基,减少未限定培养基成分的浓度,直至细胞增殖能力降低,但活力仍较高。
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2022-03-21
elisa实验原理(酶联免疫吸附实验原理及方法)
elisa实验原理酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)的基本原理是:由于抗原、抗体的反应在一种固相载体——聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去游离的反应物,从而保证实验结果的特异性与稳定性,且最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一
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