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2022-03-10
细胞瞬时转染和稳定转染步骤区别(在稳定转染和瞬时转染之间进行选择)
哺乳动物和微生物细胞的稳定转染，以及随后用于大规模生产治疗性蛋白质的扩展，是一项标志性的生物加工操作。由于培养基和补料策略、过程分析/理解和单元操作优化方面的进步， 现在通常可以实现每升高达 10 克单克隆抗体 (mAb) 的特定滴度。稳定转染的主要缺点是需要时间。典型的分批补料培养会持续数周，并在此期
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2022-03-10
DNA复制是如何发生的？涉及的酶有哪些？
起始、 延伸 和 终止 是 DNA 复制的三个主要步骤。现在让我们更详细地了解它们中的每一个：第 1 步：启动复制开始的点称为复制起点 (oriC)。解旋酶带来了链分离的过程，这导致了复制叉的形成。第 2 步：伸长率DNA 聚合酶 III 通过读取模板链上的核苷酸并专门添加一个接一个的核苷酸来制造新链。如果它
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2022-03-10
微生物如何在胃中存活(胃是无菌的吗)
我们的胃在杀死细菌或病原体方面非常有效。它具有高度酸性的 pH 值，大约为 1-2（1 为强酸性，7 为中性，14 为强碱性）。这有效地杀死了我们摄入的几乎所有病原体，然后它们才能到达我们的肠道。我们的肠道有碱性介质，非常有利于这些微生物的生长。显然，胃不仅仅是消化我们的食物。然而，这让我想到了下一个问题——
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2022-03-10
DNA萤光染色法检测支原体
利用萤光染剂（bisbenzimide, Hoechst 33258）侦测支原体污染。此染剂会结合到DNA之Adenosine-Thymidine (A-T) rich区域，因为支原体之DNA中A-T含量占多数（55～80%），所以可将其染色而侦测。被支原体污染之细胞经染色后，在细胞核外与细胞周围可看到许多大小均一之萤光小点，即为支原体之DNA，证明有支原体之污染
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2022-03-09
冰冻切片免疫荧光染色步骤(冰冻切片免疫荧光实验步骤)
观察组织中目的蛋白的定位，一般可以选择冰冻切片进行免疫荧光。冰冻切片制作时间短，操作过程简单快捷，同时获得的免疫荧光图片相对于免疫组化图更加漂亮。冰冻切片多用于新鲜组织、甲醛固定组织和冰箱冷藏组织等。用高分子材料配制成冰冻切片包埋液，将冰冻包埋液直接可直接在切片机组织卡盘上加少许包埋液，在其
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2022-03-09
免疫组织化学染色(免疫组织化学常见问题及处理方法)
这里把IHC入门的坑都填了免疫组织化学（Immunohistochemistry, IHC）是免疫染色最常见的应用，其原理是利用抗体与生物组织中的抗原特异性结合从而选择性的识别组织切片细胞中的抗原。IHC广泛用于诊断异常细胞，如在肿瘤中的异常细胞；特定细胞事件的标记，如增殖或细胞死亡(凋亡)。此外，IHC也广泛用于基础研
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2022-03-09
细胞免疫荧光染色(免疫荧光染色原理)
免疫染色包括免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、免疫细胞化学(ICC)等，可以参考如下步骤进行操作。样品准备对于贴壁细胞：可以直接用多孔板，例如6孔板、24孔板等，培养细胞，然后到预定时间时进行固定等后续操作。也可以用洁净的盖玻片，70%乙醇中浸泡后，用无菌的镊子放置到6孔板内，然后用无菌的生理盐水
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2022-03-09
免疫组化染色方法有哪些(免疫荧光染色诊断是什么)
免疫染色包括免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、免疫细胞化学(ICC)等，可以参考如下步骤进行操作。样品准备对于贴壁细胞：可以直接用多孔板，例如6孔板、24孔板等，培养细胞，然后到预定时间时进行固定等后续操作。也可以用洁净的盖玻片，70%乙醇中浸泡后，用无菌的镊子放置到6孔板内，然后用无菌的生理盐水
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2022-03-08
DMSO在细胞冻存中的作用
细胞冻存是将细胞存储于低温环境，减少细胞代谢，达到长期储存的一种技术。细胞冻存的基本原则是慢冻，这是因为当细胞冷到0℃以下时细胞器会发生脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶，而缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶，因为大结晶容易造成细胞膜、细胞器的损伤和破裂。目
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