细胞冻存是将细胞存储于低温环境,减少细胞代谢,达到长期储存的一种技术。
细胞冻存的基本原则是慢冻,这是因为当细胞冷到0℃以下时细胞器会发生脱水,细胞中可溶性物质浓度升高,并在细胞内形成冰晶,而缓慢冷冻,可使细胞逐步脱水,细胞内不致产生大的冰晶,因为大结晶容易造成细胞膜、细胞器的损伤和破裂。
目前,细胞冻存常用的技术是液氮冷冻保存法,主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。
DMSO
01
DMSO(二甲基亚砜)是细胞冻存中常用的低温保护剂,它是一种渗透性保护剂,可迅速透入细胞,提高细胞膜对水的通透性,降低冰点,延缓冻结过程,能使细胞内水分在冻结前透出细胞外,在胞外形成冰晶,减少胞内冰晶,从而减少冰晶对细胞的损伤。
02
DMSO本身具有灭菌作用,因而在使用前不要对其进行高压灭菌,避免破坏其分子结构,以致降低冷冻保护效果。在常温下,DMSO对人体有毒,故在配制时应注意带手套。