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2022-10-10
ELISA实验样本处理方法汇总,几种比较常规的样本类型处理方法
常规用于ELISA实验的样本包含血清、血浆、细胞培养上清、尿液以及组织匀浆等。不同样本类型的预处理方法存在差异,合适的样本预处理是确保ELISA实验正确性和准确性的第一步。这里,我们将介绍几种比较常规的样本类型处理方法。ELISA实验样本处理方法汇总,几种比较常规的样本类型处理方法1.血清血清是ELISA实验
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2022-10-10
RAW264.7培养经验分享
1.细胞背景:小鼠来源白血病毒诱导肿瘤细胞,属于巨噬细胞,贴壁生长。形态以类圆形和不规则为主,一般1~2个核,极少数有3个核,胞浆伸展时胞体较大。镜下细胞为小珍珠似的圆形椭圆形。2.基本培养情况:培养条件:10%FBS,DMEM高糖,进口gibco血清。传代:细胞增殖较快,70%即可传代,细胞有触角也提示
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2022-10-10
Western blot 实验原理及步骤
Westernblot 的实验基本原理:本实验是对蛋白进行定性和半定量分析;免疫印迹(immunoblotting)又称蛋白质印迹(Western blotting),是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹具有 SDS-PAGE
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2022-10-10
流式细胞检测实验流程步骤
流式细胞技术(Flow cytometry, FCM)是利用流式细胞仪进行的一种单细胞定量分析和分选技术。流式细胞术是单克隆抗体及免疫细胞化学技术、激光和电子计算机科学等高度发展及综合利用的高技术产物,它能有效地从单细胞水平区分异质性细胞群体,检测对象包括但不限于悬浮细胞、贴壁细胞或从实体组织分离的单细胞悬液和其
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2022-10-10
细胞培养之黑胶虫(细胞培养黑胶虫实验)
1、分类上的描述对于黑胶虫的分类,学术界没有明确给予说法。关于黑胶虫的分类,目前大部分人认为黑胶虫污染是微生物感染。在一些文章论述上把黑胶虫归为生物污染类型,但是没把它归为确定的生物分类类型,只是把黑胶虫独立为一种未知生物。而根据中国病毒所和军科院鉴定是一种寄生于牛血清内的一种原虫,似乎和草履
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2022-10-09
细胞如何传代(实验步骤盘点)
一、概念细胞传代:在细胞培养过程中,去除原培养基并将细胞从原培养体系转移到新鲜的培养基中,维持细胞的活力与增殖。细胞传代既可以扩大细胞培养量,也能够避免细胞因进入平台期而出现生长抑制甚至死亡的情况。二、实验步骤1. 贴壁细胞的传代:1) 倒置显微镜下观察细胞形态及密度,评估细胞的状态,以
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2022-10-09
免疫沉淀抗体选择技巧
免疫沉淀实验中需要用到捕获抗体(IP)、检测抗体以及二抗(WB),如何选择对很多小伙伴来说可能还有些难度。根据多年的实验经验总结了以下几点。捕获抗体最好是挑选有文献报道或厂家验证过IP应用的产品更稳妥。为了减少或消除IP洗脱产物中抗体重轻链的影响,可以:1)选择与捕获抗体不同种属的检测抗体,配合种
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2022-10-09
TUNEL法检测细胞凋亡实验原理和经验总结
一、TUNEL法的实验原理细胞凋亡中, 染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端,从而可进行凋亡细胞的检测,这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶
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2022-10-09
稳转细胞株构建步骤(稳转株构建原理及方法)
什么是稳转株?稳转株即稳定表达的细胞株,指基于某一细胞系构建的持续过表达或干扰某特定基因的细胞系。为什么要建立稳转株?通过建立稳转细胞系,可以降低频繁转染或者病毒包装的成本,方便在目的细胞中研究基因功能实验研究;区别于瞬时转染只能干扰表达,无法去除已表达的目的蛋白,构建稳转细胞系
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