1.细胞背景:

　　小鼠来源白血病毒诱导肿瘤细胞，属于巨噬细胞，贴壁生长。

　　形态以类圆形和不规则为主，一般1～2个核，极少数有3个核，胞浆伸展时胞体较大。镜下细胞为小珍珠似的圆形椭圆形。

　　2.基本培养情况:

　　培养条件：10%FBS,DMEM高糖，进口gibco血清。

　　传代:细胞增殖较快，70%即可传代，细胞有触角也提示需要传代，1:3--1:6传代，推荐使用皿。传代时切记不要使用胰酶，正常情况下此细胞贴壁不牢，直接吹打即可，胰酶消化会使细胞伸出触角改变形态。直接用培养基吹打，也可以用PBS，感觉无差异。

　　冻存和复苏：和普通细胞无异。

　　细胞生长状况：RAW264.7作为巨噬细胞有很强的吞噬能力，吞噬抗原后伸出长角，就是大家常见的伪足。同时贴壁黏附能力增强，传代时难以消化下来。

　　该细胞贴壁时间短，成片生长，似小菌落般小片生长，最后连,成一片并会叠层。传代密度不易过高或者过低，过低会导致细胞生长缓慢甚至不生长，过高，细胞会长出伪足

　　3.关于RAW264.7分化:

　　正常细胞为贴壁不牢的圆形椭圆形细胞，分化后伸出伪足，贴壁能力增强。

　　避免方法：

　　①血清最好是进口的真血清。

　　②密度不要太高或者太低，尤其是需要传代时切不可拖延时间的。

　　③传代时切不可胰酶消化，直接吹打就能下来。

　　④不要污染，包括其他细胞株的污染。

　　4.关于RAW264.7亚系:

　　正常细胞为贴壁不牢的圆形椭圆形细胞，分化后伸出伪足，贴壁能力增强。

　　避免方法：

　　①RAW264.7有多种亚系，不同亚系有个别基因表达的差异，具体可在ATCC官网查看。

　　②有的亚系，稍微一吹就下来，有的就需要1ml枪头反复吹打。

　　③根据我们培养的几种RAW细胞情况，传代不需要胰酶消化，可用培养基直接吹打。如果难以吹下，可尝试用冷PBS稍微洗一下吹打，当然也可以直接用冷PBS吹打。

　　④RAW264.7是有一些细胞会有触角的。不过，若培养液有点脏，细胞也不是特别透亮，则考虑是否有污染。RAW作为巨噬细胞系对污染很敏感。

　　⑤RAW264.7细胞系培养基使用要注意，不同亚系可能有所不同。有的只用 1640培养基，有的用高糖。所以要细胞培养前，相关信息要查阅清楚。