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2022-12-05
WB实验代测的原理与基本过程
Western免疫印迹(WesternBlot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。WB实验代测原理:1、WB实验代测采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE(
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2022-12-05
WB实验全过程和步骤
一、实验步骤详解(一) 配胶1. 洗玻璃板:用洗洁精洗净,再用蒸馏水冲洗后,使用无水乙醇进行润洗,放置,自动晾干(或使用吹风机吹干)。2. 配置分离胶:制备 5 ml/gel的分离胶,用合适规格的移液枪吸取 1.9 ml/gel DDW、1.7 ml/gel 30% Acr-Bis(29:1)、1.3 ml/gel 分离胶缓冲液、0.05 ml/gel 10% A
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2022-12-04
染色质免疫共沉淀的方法
目前,不断发展的DNA和蛋白质相互作用的方法和技术已经成为研究DNA复制、重组、修复和转录的核心。今天跟大家分享的是花样百出、拽酷炫的染色质免疫共沉淀的方法!染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation, CHIP)原理值得注意的是,它是目前*个研究体内 DNA与蛋白质相互作用的方法。在生理状态下
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2022-12-04
单细胞凝胶电泳操作规程
一、编号:JS0603二、标题:单细胞凝胶电泳操作规程三、关键词:单细胞凝胶电泳 操作规程四、目的:规范单细胞凝胶电泳的操作,提高单细胞凝胶电泳试验结果的可比性。五、背景知识:单细胞凝胶电泳分析(single cell gel eletrophoresis,SCGE)是由Ostling等(1984)首创,后经Singh等(1988)进一步
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2022-12-03
单细胞悬液制备操作规程
一、编号:JS0602二、标题:单细胞悬液制备操作规程三、关键词:单细胞悬液 操作规程 流式细胞术四、目的:规范单细胞悬液制备的操作五、背景知识:单细胞悬液的制备是流式细胞术的前期准备工作之一。六、原理:实体组织制备单细胞悬液可用酶消化、机械法。七、材料:0.25%胰酶,0.01mol/L P
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2022-12-03
免疫细胞分离方法详解
免疫细胞(immune cell)俗称白细胞,包括淋巴细胞和各种吞噬细胞等,也特指能识别抗原、产生特异性免疫应答的淋巴细胞等。淋巴细胞是免疫系统的基本成分,在体内分布很广泛。除淋巴细胞外,参与免疫应答的细胞还有浆细胞、粒细胞、肥大细胞、抗原呈递细胞及单核吞噬细胞系统的细胞。免疫细胞分离方法:1、根
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2022-12-02
细胞分离,传代以及合适的酶类选择
研究中我们常常会用到现成的细胞系/株,一般只需要进行细胞传代和保种。然而,这些细胞系常常由于长期体外培养,而丢失原有生物学特性,对药物处理的反应差距越来越大。因此,也有越来越多的人选择原代细胞。原代细胞(Primary cells):是指直接从机体取出的组织或细胞获得单个细胞并在体外进行培养的细胞。组织
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2022-12-02
电子显微镜有哪些种类
电子显微镜是科研实验室的重要实验设备,那么电子显微镜有哪些种类呢?其实,常见的类型主要有3种:透射电镜 TEM、扫描电镜SEM以及反射电镜REM。一、透射电子显微镜 TEM透射电子显微镜是电子显微镜的原始类型,它的主要原理是将高压电子束引导至样品以照亮样品并产生样品的放大图像。由于透射电镜具有原位观
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2022-12-02
外泌体在疾病诊断与治疗上的应用方法
外泌体是一种由活细胞分泌到细胞外环境的小囊泡,是细胞间信息传递的重要载体。外泌体携带大量特异性的蛋白质以及功能性的DNA、mRNAs、miRNAs等,在体内参与细胞通讯、细胞迁移、促血管新生和抗肿瘤免疫等生理过程,与多种疾病的发生和进程密切相关。外泌体的各个组分既可以当成疾病诊断的标志物,又可以作为疾病治疗的
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