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2023-03-27
细胞实验:原代细胞鉴定技术操作步骤
动物组织是由多种类型的细胞组成的,包括表皮细胞、成纤维细胞、内皮细胞等。分离出的细胞是否是实验所需类型的细胞则需要进行鉴定,除了基本的形态学观察外常用的就是免疫组织化学检测。原代细胞鉴定技术操作步骤:1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时
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2023-03-27
影响细胞转染实验转染因素有哪些
影响细胞转染实验转染因素 :1、血清血清影响复合物的形成,降低转染效率阳离子脂质体和 DNA 的*佳量在使用血清时会有所不同,因此想在转染培养基中加入血清时要进行条件优化。大部分细胞可以在无血清培养基中几个小时内保持健康,对于对血清缺乏比较敏感的细胞,可以使用 OPTI-MEM I 培养基。对于对血
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2023-03-26
如何避免血清产生沉淀物(防止血清沉淀的方法)
血清,指血液凝聚后,在血浆中除去纤维蛋白分离出的淡黄色通明液体或指纤维蛋白已被除去的血浆。其主要作用是供给根本营养物质、供给激素和各种生长因子、供给结合蛋白、供给促接触和扩展因子使细胞贴壁免受机械损害、维护培育中的细胞等。但是有的时候血清会出现沉淀的现象,接下来就为大家介绍一下防止血清沉淀的方法
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2023-03-26
细胞实验原理及操作步骤过程
细胞实验原理:在不加任何条件下直接冻存细胞时,细胞内和外环境中的水都会形成冰晶,能导致细胞内发生机械损伤、电解质升高、渗透压改变、脱水、PH改变、蛋白变性等,能引起细胞死亡。如向培养液加入保护剂,可使冰点降低。在缓慢的冻结条件下,能使细胞内水份在冻结前透出细胞。贮存在-130℃以下的低温中能减少冰
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2023-03-25
免疫荧光实验操作步骤
免疫荧光实验的主要步骤包括细胞片制备、固定及通透(或称为透化)、封闭、抗体孵育及荧光检测等。基本实验步骤:(1) 细胞准备。对单层生长细胞,在传代培养时,将细胞接种到预先放置有处理过的盖玻片的培养皿中,待细胞接近长成单层后取出盖玻片,PBS洗两次;对悬浮生长细胞,取对数生长细胞,用PBS离心洗
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2023-03-25
ELISA实验中如何优化包被
将抗原或抗体固定在进程称为包被(coating)。换言之,包被便是抗原或抗体结合到固相载体外表的进程。蛋白质与聚苯乙烯固相载体是经过物理吸附结合的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体外表的疏水基团间的作用。接下来就向大家介绍一下在ELISA实验中优化包被的方法。一、挑选合适的包被抗原包被抗原
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2023-03-24
细胞长得慢的原因有哪些,常见细胞生长缓慢的六种原因盘点
1、培养基可能缺乏细胞生长所需的某种因子通常情况下,当小伙伴购买细胞,并没有按照ATCC或国内细胞库推荐的方法制备培养基,使用实验室兄弟姐妹使用的培养基来培养细胞。解决方法一般是按照推荐的方法制备培养基,或直接购买培养细胞的培养基。2、支原体、xi菌、真jun等污染:虽然培养基中通常添加双抗体(青霉素
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2023-03-24
判断细胞有没有贴壁的方法(怎么判断细胞有没有贴壁)
1.培养液清亮透明不浑浊,对光观察培养瓶底,可见有成片物质附着,即为细胞,可以证明细胞已经贴壁。如果此时培养液颜色偏红不黄,说明营养还可以。2.培养液偏红色,但是浑浊,说明细胞没有贴壁(是细胞悬浊液,当然不清亮透明),且没有微生物污染,因为污染后培养液常迅速变黄。3.培养液浑浊,发黄,说明没有贴
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2023-03-24
利用血清瓶进行血清的灭活操作
作为细胞生长所需的营养物质,血清在细胞培养中的作用不言而喻,而血清的好坏、无菌程度也是决定实验成功与否的关键,那么,怎样对血清进行灭活操作呢,这就需要用到血清瓶。血清灭活操作步骤如下:1、选择一个和血清瓶一样的瓶子作为对照瓶,把对照瓶内倒入和血清等体积的蒸馏水,作温度的测量。2、温度
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