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利用血清瓶进行血清的灭活操作

2023-03-24 10:22:41
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   作为细胞生长所需的营养物质,血清在细胞培养中的作用不言而喻,而血清的好坏、无菌程度也是决定实验成功与否的关键,那么,怎样对血清进行灭活操作呢,这就需要用到血清瓶。

  血清灭活操作步骤如下:

  1、选择一个和血清瓶一样的瓶子作为对照瓶,把对照瓶内倒入和血清等体积的蒸馏水,作温度的测量。

  2、温度的调节。在对照组的瓶子里插入两个水银温度计,放在水浴箱,在温度计显示56度时候,调节校准水浴箱的温度56度。

  3、将血清瓶和对照瓶一起放入水浴箱,温度调到56度,水浴半小时,灭活之后分瓶装,做无菌实验,在-70—-20度下保存。

  4、要观察冰冻血清的颜色和透亮度,颜色偏红或者颜色偏浅有沉淀表示血清质量不好,因此要选择质量好的血清灭活。

  5、血清的使用要避免多次的反复解冻,会增加血清被污染的概率和降低血清的质量,一但反复解冻的血清出现沉淀那么表示血清不可用或者质量极差。

  6、为了保证实验的结果的稳定,保证血清分瓶时候要摇匀,然后分瓶,尽量使用同一血清保证统一变量的原则。

  以上是利用血清瓶进行血清灭活操作的具体步骤,但值得一提的是,在多数的细胞培养中,血清的热灭活并不是必要的。很多场合下,热灭活并不会改善细胞的生长,反而会破坏血清、增加沉淀状况。除非文献指出该细胞必须使用灭活血清,一般细胞培养可省略血清热灭活步骤。

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