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2022-03-21
细胞爬片制备具体过程解析( 细胞爬片详细操作方法以及技巧)
细胞爬片制备具体过程解析( 细胞爬片详细操作方法以及技巧)爬片的准备1.爬片可用一般的盖玻片,也可用专用爬片;2.将盖玻片剪裁成合适的大小,以备置于6孔板、12孔板或24孔板;裁剪时用小沙轮轻划一下,稍用力掰开。如接种大皿,请不要将盖玻片切开,直接清洁后放入培养皿中,待染色时再切开,这样既保证了细胞
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2022-03-21
DNA纯化实验方法(纯化dna的常规方法及其原理)
PCR清洁试剂盒纯化法方法原理硅胶膜可在高盐条件下结合DNA,又可在低盐条件下与DNA分离。DNA溶液中的引物、单核苷酸、酶、矿物油、盐离子等杂质因为没有与DNA相似的特性,所以被分离开来。实验材料:PCR产物,试剂、试剂盒,PCR清洁试剂盒仪器耗材:96孔DNA制备板、96孔深孔板、96孔V型底板
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2022-03-21
研究DNA蛋白质相互作用(迁移率变动分析法)
研究DNA蛋白质相互作用(迁移率变动分析法)01迁移率变动分析本方案可分4个阶段:①制备含特异蛋白质结合位点的放射性标记DNA探针;②制备非变性凝胶;③结合反应:蛋白质混合物与DNA探针结合;④蛋白质-DNA复合物凝胶电泳、干胶及放射自显影(图12.2.1)。典型DNA结合迁移率变动实验的放射自显影示
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2022-03-20
哺乳动物细胞中制备核和细胞质提取物(细胞核提取步骤)
从培养细胞中分离的细胞核制备的提取物能够在体外精确地转录并进行mRNA加工。因此这些提取物可以直接用于功能研究,并作为纯化这些过程所涉及的蛋白质的起始材料。01核提取物的制备材料转瓶或单层培养的哺乳动物细胞(如HeLa细胞)PBS低渗缓冲液低盐高盐缓冲液,含 1.2 mol/L KCI透析缓冲
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2022-03-20
Northern Blot原理及实验方法(诺瑟杂交方法及步骤)
实验原理及用途原理:在变性条件下将待检的RNA样品进行琼脂糖凝胶电泳,继而将在凝胶中的位置转移到硝酸纤维素薄膜或尼龙膜上,固定后再与同位素或其它标记物标记的RNA探针进行反应。用途:检测样品中是否含有基因的转录产物(mRNA)及其含量。用具准备180度烤器皿:三角锥瓶、量筒、镊子、刀片等4小时
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2022-03-20
细胞培养注意事项(细胞培养时的常见问题及解决办法)
摘要:抗体的生产可通过不同的方式,哺乳动物细胞生产或刺激动物免疫系统生产,本文主要了介绍两者的生产方式和区别。细胞污染凡是对细胞生长有危害的成分或者造成细胞不纯的异物都视为污染。细胞污染根据污染源可以分为化学污染,物理污染和生物污染。化学污染细胞培养所用到的培养基,水要高压蒸汽锅
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2022-03-19
细胞复苏实验的步骤(细胞复苏的技术原理和操作步骤)
细胞复苏是将休眠的细胞重新活化,使之重新生长,进入细胞周期,进而分裂产生子细胞的过程。细胞复苏后,可进入细胞周期,重新获得细胞类型特异的生物学功能。细胞复苏实验的步骤(细胞复苏的技术原理和操作步骤)[ 实验前准备 ]将无菌培养瓶15 mL离心管、移液管、移液枪、枪头等放入无菌超净工作台,以紫外线照射
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2022-03-19
细胞传代实验指导(传代细胞培养的实验步骤及注意事项)
传代培养是细胞培养常规保种方法之一,也是几乎所有细胞生物学实验的基础。当细胞在培养瓶中长满后就需要将其稀释,分种成多瓶,细胞才能继续生长。这一过程就叫传代。传代要在严格的无菌条件下进行,每一步都需要认真仔细的无菌操作。悬浮型细胞直接分瓶就可以,而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。本实验以传代大鼠骨髓充
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2022-03-19
酶联免疫吸附试验(酶联免疫吸附试验方法类型和操作步骤)
酶联免疫吸附试验基本原理①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤
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