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2022-04-20
一个简单的SDS-PAGE凝胶配方和完美凝胶的 10 步流延协议
SDS-PAGE(代表十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)是联合生命科学家的技术。我们在研究期间都使用它来分离蛋白质分析物,因此,我们都需要一个好的 SDS-PAGE 凝胶配方。Bitesize Bio 上有一些很棒的文章,告诉您SDS-PAGE 的工作原理以及Laemmli 缓冲液的成分。还有一个解释在运行 SDS-PAGE 凝胶时是否使用恒定
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2022-04-20
蛋白质复性工具包:蛋白质重折叠的 21 个技巧和窍门
表达您感兴趣的蛋白质但不确定它是否正确折叠?继续阅读以发现重折叠蛋白质的建议和技巧。包容性机构的问题细菌蛋白质表达是获得大量蛋白质用于分析、结构研究等的好方法。但是,当您多次表达重组蛋白并且它拒绝在您的纯化过程中出现,而是停留在包涵体 (IBs) 中时,方便常常会变成挫败感。当您的蛋白质在表达
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2022-04-20
流式细胞术已成为病毒:介绍流式细胞术
毫无疑问,您听说过流式细胞术,这是在单细胞水平上分析异质细胞群的首选方法。但是,嘿!你想知道一种很酷的方法来检测和区分病毒颗粒吗?你听说过流动病毒测定法吗?如果你还没有,那么你来对地方了!我们将带您了解这项技术是什么,它的应用和与您的生物学研究的相关性,以及您如何在实验中开始使用它。当前
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2022-04-20
蛋白质染色方法:3 种最佳方法概述
在SDS-PAGE或2 维电泳之后对蛋白质进行染色对于可视化整体蛋白质群或检查重组蛋白质的表达是必要的。但是你怎么知道使用哪种蛋白质染色方法呢?本文解释了三种最常见的蛋白质染色方法的优缺点:银染、考马斯亮蓝染色和 InstantBlue ™染色。1. 银渍需要无需下游应用的高灵敏度染色剂?银色染色可能正是
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2022-04-19
总RNA提取:获得高纯度RNA的简单方法
虽然 DNA 可以存活数千年,但 RNA 的寿命很短,这会使总 RNA 的提取变得棘手,因为 RNA 容易被称为 RNases 的酶降解,这种酶无处不在。因此,从细胞和组织中分离总 RNA 需要一种能够有效地从样品中分离 RNA,同时最大限度地减少 RNA 降解的方法。什么是总RNA?如您所料,总 RNA 是在细胞内发现的所有 RNA
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2022-04-19
为什么SDS-PAGE是垂直运行的?这里有3个很棒的答案
SDS-PAGE 凝胶组装起来有点棘手。制作分离胶,倾倒,加入异丙醇,等待,擦去异丙醇,制作浓缩胶,倾倒,等待——天哪!此外,如果你没有得到恰到好处的密封,未聚合的凝胶会泄漏,然后你必须重新开始。等等——为什么 SDS-PAGE 还是垂直运行?拥有一个水平 SDS-PAGE 系统会更简单。毕竟,琼脂糖凝胶电泳
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2022-04-19
蛋白质结构分析:蛋白质数据库文件中的额外信息
分子生物学的中心法则有力地解释了信息从 DNA 到 RNA 和 RNA 到功能性蛋白质的单向流动。还有什么信息比实验结构更具影响力和功能相关性?无论您研究什么,无论您的检测目标位于中心法则中的何处,以及您的原生宿主在生命树上的何处,都涉及到功能性蛋白质。您可以为您的实验分离 RNA,而很少进行蛋白质结构
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2022-04-19
影响最终质粒产量的主要因素,质粒产量低的 11 个原因
在进行质粒制备时,获得良好的质粒产量至关重要。那么什么是好的收益呢?您如何优化您的制备以获得良好的质粒产量,是什么导致了低产量?我们将在下面介绍这些问题以及更多内容。什么是质粒制备的好产量?有三种主要的质粒制备类型:mini、midi 和 maxi。质粒 DNA 的量因方案和试剂盒而异,但表 1 提供了这三
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2022-04-18
磷酸化蛋白Western Blot实验注意事项剖析
关于/磷酸化蛋白样品,裂解液问题蛋白的磷酸化是一个非常迅速的反应,所以取样品的过程要迅速,样品要新鲜,样品处理最好在冰上操作,操作时间尽量短。用PBS洗涤细胞时,PBS一定要4℃预冷。如果是组织的话,提取蛋白时采用液氮研磨的方法,研磨器具最好提前预冷,保持低温的状态。提取磷酸化蛋白的裂解液最好是
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