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2022-06-17
小鼠成肌细胞(C2C12 )成肌分化培养方法与流程
C2C12 (小鼠成肌细胞)是由D·Yaffe和O·Saxel建立的小鼠成肌细胞株的亚克隆。C2C12细胞分化很快,容易形成可伸缩的肌管并生成特征性的肌蛋白。用骨形成蛋白2(BMP-2)处理C2C12细胞,会导致C2C12细胞的分化途径从成肌细胞转换为成骨细胞。C2C12作为研究肌肉理想的细胞模型,在实验研究中常诱导其分化为多核肌管。成
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2022-06-16
micro RNA功能研究的动物模型有哪些?
1、秀丽隐杆线虫(C. elegans)秀丽隐杆线虫是自受精的雌雄同体,可以产生大量基因完全相同的后代。完整测序的线虫基因组显示,约60%的miRNA与人类同源。秀丽隐杆线虫中保守的miRNA家族成员数量较少,因此研究秀丽隐杆线虫中的miRNA功能排除了冗余这一障碍。此外,秀丽隐杆线虫的可视可追溯、组织良好的透明体使其成
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2022-06-16
有关流式细胞术的应用
一、流式细胞术可以用来检测细胞表面以及胞内的各种标志,对细胞进行分群鉴定以及各种蛋白表达量高低的比较。不仅仅是免疫细胞,其他的如肿瘤细胞、成纤维细胞、干细胞等都可以用流式细胞术进行检测分析和分选。二、通过标记Ki67、BCL-2、caspases等增殖及凋亡相关基因,流式细胞术可用来检测细胞的增殖以及凋亡。
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2022-06-16
Tet-on/off 系统—实现基因的诱导表达
1992年Goseen等人成功的利用原核基因调控元件构建了四环素(tetracycline,Tet)真核细胞基因调控表达系统。目前,此系统已被广泛应用于基因功能和基因治疗领域的研究。1.四环素调控表达系统的基本原理Tet调控表达系统通过诱导药物(如四环素和强力霉素等)改变调控蛋白的构象,从而达到调控目标蛋白表达的目的。
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2022-06-16
包慢病毒应注意什么(慢病毒原理及注意事项)
慢病毒介绍慢病毒(Lentivirus)载体是以 HIV-1 (人类免疫缺陷1型病毒)为基础,使用疱疹病毒VSVG 外壳蛋白发展起来的工具载体。其毒性基因已经被剔除并被外源性目的基因所取代,属于假型病毒。慢病毒具有感染谱广泛特点,并且可以有效感染分裂和非分裂细胞。一经感染宿主细胞,慢病毒即利用反转录酶将其RNA转录
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2022-06-15
细胞常规检查观察的方法(细胞原代培养常规检查)
原代培养是指直接从机体取出细胞、组织和器官后立即进行培养,原代培养是建立细胞系的第一步。因此,较为严格地说原代培养是指成功传代之前的培养,此时的细胞保持原有细胞的基本性质,如果是正常细胞,仍然保留二倍体数。但实际上,通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养,原代培养的细胞叫做细胞株,
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2022-06-15
细胞培养用什么培养基(常用培养基及基本特性)
培养细胞的重要环节有很多,其中很重要的一步就是为细胞选择适合的生长环境,为其选择成分适合又营养丰富的细胞培养基。细胞培养基是供给细胞营养、维持细胞生长和增殖的多种营养物质的混合物,种类一般包括经典/基础培养基、无血清培养基以及化学成分确定的培养基等。这其中又以经典/基础培养基最为常用。1、RPMI-
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2022-06-15
关于动物细胞培养的几个问题(切取组织块是否需要无菌环境)
动物细胞培养是动物细胞工程的基本技术,无论是动物细胞融合、细胞核移植,还是体外受精及胚胎移植都需要进行动物细胞培养,只不过培养的细胞类型有所差异而已。因此,动物细胞培养技术非常重要,但教材中对于操作技术并没有十分具体的指导,致使老师和同学都产生了各种错误的认识。这里根据自己在BDS教学时积累的相关资
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2022-06-15
细胞培养用什么培养液(细胞培养用液有哪些)
一、细胞培养所需的培养液在细胞的研究和利用过程中,最主要的是要为细胞提供最适的生长条件,保持细胞培养开始时的群体状态。这就要求培养条件始终如一,近乎呆板地坚守细节和常规,而且细胞培养,试剂昂贵,费时、费力,不是随随便便就可以进行的。细胞只有在最适生长条件下,才会保持正常的核型及功能。如果
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