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2022-07-30
做细胞复苏实验有什么注意事项
细胞复苏和冻存讲究“慢冻快溶”,复苏时一定要将冻存在液氮或-80℃中凝固的细胞冻存液快速融化至37℃,使胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。细胞复苏注意事项复苏时动作要快,尽量减少胞内形成冰晶,影响复苏后细胞活率。 融化时尽量不要碰到管口,以免容
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2022-07-29
ELISA的基本原理是什么
ELISA是指以酶作为标记物、以抗原和抗体之间免疫结合反应为基础的固相吸附测定方法。因此,一个ELISA测定试剂,其有机组成部分包括:(1)包被的抗原或抗体的固相支持物,即聚苯乙烯塑料微孔或试管;(2)酶标记的抗体或抗原和(3)酶的反应底物等。抗原或抗体的固相化,并不影响其免疫结合活性,酶标记的抗体或抗原亦是
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2022-07-29
荧光定量PCR实验荧光标记
荧光定量PCR技术是将常规的PCR和荧光检测技术相结合,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,以此实现对初始模板的定量分析。荧光定量PCR技术作为当今生物学研究的重要手段之一,在基础科学、生物技术、医学研究、法医学、诊断学等多方面具有广泛的应用前景。说到荧光定量PCR技术,我们经常会问类似于“你的实验是染
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2022-07-29
RT和qPCR数据评估的整个工作流程,教你去改进qPCR数据
关于实时荧光定量PCR技术,最常见的应用是通过RT-qPCR进行基因表达分析、疾病诊断和管理(如病毒定量)、食品检测(如转基因或过敏原分析)以及动物或植物育种等研究。这种方法非常灵敏,因此为了得到可靠的实验数据,避免错误是十分重要的。RT和qPCR数据评估的整个工作流程包括以下几点:1、实验设计2、样品的
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2022-07-29
怎么去确认RNA的质量,测RNA浓度、纯度和完整性的方式
实时荧光定量PCR技术是通过测定RNA的转录水平来评估基因的活力。RNA样本提取的质量直接影响基因表达分析。影响RNA品质的因素有以下三种:RNA浓度、RNA纯度和RNA完整性。检测RNA浓度、纯度和完整性的方式主要有以下几种:紫外分光光度计法:测量260nm吸收值计算RNA浓度,测量260nm/280nm吸收值的比值,用于评
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2022-07-28
如何确定引物扩增效率,PCR扩增效率的评估解析
做过PCR的小伙伴都知道,PCR前期的验证引物探针性能和确定最适反应条件是确保正式实验顺利进行的前提。PCR实验中有个相当重要的工作——即是PCR扩增效率的评估。扩增效率是PCR检测性能最重要的指标之一,也是定量分析计算结果时所需要的参数。接下来,让小编给大家细细说来吧。什么是扩增效率PCR是一种DNA体外扩
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2022-07-28
细胞培养基的几种检测方法介绍,细胞培养基的检测方法解析
现代生物技术均通过细胞系作为载体来进行,无论是基因治疗、干细胞、克隆技术都在细胞内进行的。细胞的生长需要一定的营养环境,用于维持细胞生长的营养基质称为培养基,即指所有用于各种目的的体外培养、保存细胞用的物质,就其本意上讲为人工模拟体内生长的营养环境,使细胞在此环境中有生长和繁殖的能力。它是提供细
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2022-07-28
是什么原因让细胞生长缓慢,细胞生长变慢是原因?
导致细胞生长缓慢的常见原因:一、培养基可能缺乏细胞生长所需的某种因子,出现这种情况一般都是小伙伴们购买细胞后没有按照ATCC或国内细胞库的方法配制培养基,就使用实验室师兄师姐用的培养基去养细胞。处理方法一般来说就是按照方法配制培养基,或是直接购买所养细胞专用的培养基。二、细菌、支原体、真菌等
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2022-07-28
免疫共沉淀(co-IP)的具体步骤
免疫共沉淀(co-IP)的具体步骤:1. 细胞用预冷的PBS液洗涤2次,最后洗涤完成后吸干PBS液。2. 加入预冷的RIPA Buffer(1ml/107个细胞、6cm培养皿、75cm2培养瓶)。3. 刮留细胞:用预冷的细胞刮子将细胞从培养皿或培养瓶中上刮下,将悬液转入1.5mlEP管中,EP管插冰上,置于水平摇床上缓慢晃动15min。4.
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