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2022-10-13
用血细胞计数板进行细胞计数实验
简介用胰蛋白酶消化单层培养,或从悬浮培养中取样;准备一张盖玻片,将细胞加到血细胞计数板的小室内。在显微镜下计数细胞,计算细胞浓度。来源:动物细胞培养:基础技术指南第五版操作方法用血细胞计数板进行细胞计数实验原理用胰蛋白酶消化单层培养,或从悬浮培养中取样;准备一张盖玻片,将细胞加到
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2022-10-12
细胞粘附实验方法
细胞粘附实验通常分为两类,即细胞与细胞粘附和细胞与基质粘附。机体内许多细胞,如上皮细胞固定在某处发挥功能;另一些细胞,如白细胞,活跃运动,就需要不断调节细胞粘附。细胞粘附性的改变在肿瘤转移过程中也发挥着重要作用。恶性肿瘤具有从原发瘤分离及在体内扩散的能力,提示这些细胞相互识别及粘附机制发生了改变
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2022-10-12
肿瘤恶性化表型研究(细胞迁移,细胞侵袭,细胞增殖的研究)
肿瘤恶性化表型研究,最常见的为细胞迁移,细胞侵袭,细胞增殖的研究。今天为大家介绍一下其对应的实验原理与方法。一:检测细胞迁移能力,最常见的实验为细胞划痕。(1)实验原理:细胞在接收到迁移信号或感受到某些物质的梯度后而产生的移动。细胞划痕实验室研究细胞迁移的最常用的体外试验方法。当细胞长到融
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2022-10-12
细胞划痕实验方法
细胞划痕肿瘤细胞在体外仍具有迁移的能力,本实验借鉴体外细胞致伤愈合实验模型,利用细胞划痕法测定了肿瘤细胞的运动特性。实验方法:将细胞密度为5~10×105个/mL的XXX细胞铺于24孔板(每孔500 μL)上,加入含10%胎牛血清的RMPI.1640培养液,培养16~24h,使形成单层细胞。用10μL移液枪枪头(或者无菌牙
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2022-10-12
细胞划痕实验详细步骤(细胞迁移入门之划痕实验)
细胞划痕实验大概是最简单的分析细胞迁移能力的试验了,但是,你以为划痕实验就是简单的给细胞”划“一个”痕迹“?并不是的,在实验操作中,你可能会状况百出,比如细胞铺板数量过多或过少啦、划痕不均一啦,细胞不迁移啦等等,所以今天,我们就一起看看如何把细胞迁移入门之划痕实验做得更好更漂亮!细胞划痕实验详细步
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2022-10-11
细胞爬片免疫荧光实验步骤分享
细胞爬片免疫荧光实验步骤分享1. 在培养板中将已爬好细胞的玻片用PBS浸洗3次,每次3min;2. 用4%的多聚甲醛固定爬片15min, PBS浸洗玻片3次,每次3min;3. 0.5%Triton X-100( PBS配制 )室温通透20min(细胞膜上表达的抗原省略此步骤);4. PBS浸洗玻片3次,每次3 min,吸水纸吸干PBS,在玻片上滴加正常山羊
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2022-10-11
细胞最佳感染MOI确定(附带常见问题解答)
MOI(multiplicity of infection),即感染复数,指的是感染时病毒与细胞数量的比值。一般认为MOI是一个比值,没有单位,其实其隐含的单位是pfu number/cell。但对于某些病毒如AAV病毒,无法用pfu表示病毒的数量,而是采用TU、IU、病毒颗粒(viral particles, v.p)或基因组数量(vector genome,v.g.)来表示病毒
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2022-10-11
免疫沉淀与免疫共沉淀基本实验步骤(IP和Co- IP实验步骤)
免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)IP是利用抗原蛋白质和抗体的特异性结合以及细菌蛋白质的“protein A/G"特异性地结合到抗体(免疫球蛋白)的FC片段的现象开发出来的方法目前多用protein A/G预先结合在argarosebeads上,与使之与含有抗原的溶液及抗体反应后,beads上的prorein A/G 就能达到吸附抗原的目的
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2022-10-11
体外血管形成实验步骤(附带实验流程)
血管生成在肿瘤的发展转移过程中起到重要作用。小管形成实验是测量在体外血管生成的一种快速的、可量化的方法。一般做的多的是研究内皮细胞的小管形成。内皮细胞结合条件培养基接种于一定基底上,易形成三维网状结构。然后通过图像分析软件对小管结果进行定量分析。一、血管形成实验步骤 1. 细胞的
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