资讯动态

细胞粘附实验方法

2022-10-12 10:33:13
|
访问量:128192

  细胞粘附实验通常分为两类,即细胞与细胞粘附和细胞与基质粘附。机体内许多细胞,如上皮细胞固定在某处发挥功能;另一些细胞,如白细胞,活跃运动,就需要不断调节细胞粘附。细胞粘附性的改变在肿瘤转移过程中也发挥着重要作用。恶性肿瘤具有从原发瘤分离及在体内扩散的能力,提示这些细胞相互识别及粘附机制发生了改变。

  实验方法:

  用10 μg/mL的纤连蛋白(fibronectin,FN)预铺96孔板,70 μL/孔,4℃过夜后,PBS洗3遍,再用1% BSA于37℃封闭1h,PBS洗3遍。将待测XXX细胞培养至对数生长期,消化细胞,用无血清培养基悬浮细胞,调整浓度为5×105/mL分别接种于预铺FN的96孔板中,每孔5000个细胞,每组设3个复孔。37℃孵育1h后,PBS洗去未黏附的细胞。

  检测方法1:3.5%戊二醛于4℃固定0.5h,PBS洗3遍;0.1%的结晶紫染色,室温静止0.5h,PBS洗3遍,每孔加入100 μL 10%的乙酸,5~10min后用酶标仪检测595nm的吸光度值,用以表示黏附细胞的多少。

  检测方法2:按照每孔加入100μL甲醇,固定15 min每孔加入100 μL吉姆萨染液,染色15min,PBS洗去染液倒置显微镜下随机取5个随机视野计数粘附细胞数量并拍照,统计结果。

  检测方法3:MTT法或CCK-8检测细胞量。


文章推荐
病理实验:固定、脱水、透明、浸蜡及包埋
2021-11-16
固定是病理制片中最为关键的一环,是对组织形态和免疫组织化学结果影···
细胞爬片免疫荧光实验步骤分享
2022-10-11
细胞爬片免疫荧光实验步骤分享1. 在培养板中将已爬好细胞的玻片用PBS···
蛋白纯化方法原理(Western blotting实验)
2022-09-21
能从成千上万种蛋白质混合物中纯化出一种蛋白质的原因,是不同的蛋白···
细胞增殖实验细胞数怎么算(细胞增殖实验细胞数怎么算出来的)
2023-04-07
细胞增殖实验是生物学研究中的一种常用实验,通过对细胞数量的测量,···
研究青光眼还能发Science子刊?!拿下中科院1区17.1分的鲁芳团队:“肠-视网膜”轴调控青光眼发病的关键机制在这里!
2024-11-11
眼睛是人体重要的感觉器官。据统计,2019年全球共有7.1亿人患有各种形···
生信分析里的森林图怎么看?1分钟速解!
2024-11-08
之前给大家分享了DCA图、列线图、UMAP图、火山图等数据图解读,今天要···
这就是科研/生活两不误?!中科院1区18.9分!同济大学江华/李宇飞团队:从国自然热点入手解决你的脱发问题!
2024-11-04
谁懂啊!看文献看到头秃,论文选题还是没有一点灵感……然而,生命科···
12种蛋白质翻译后修饰类型!速速了解一下~
2024-10-31
据说蛋白质翻译后修饰有600多种类型,但最经典的还是泛素化、磷酸化、···
  • 业务咨询

    业务咨询专线:133 7682 0615

    Email:lxyjy@wie-biotech.com

在线留言(即刻联系为您提供专业的解决方案) ×
留言咨询

感谢您的关注,如有需要请留言,我们会尽快和您联系!