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细胞转染各种操作方法

转染，是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入，转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。电穿孔法、显微注射和基因枪属于通过物理方法将基因导入细胞的范例；化学介导方法很多，如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染

细胞为什么不贴壁

一.体外培养细胞贴壁与什么有关首先并不是所有的细胞在体外培养的情况下都会贴壁，但大部分来自实体组织器官的细胞都会贴壁。二.贴壁的过程可能是这样的细胞首先分泌细胞外基质，这种细胞外基质黏附在支持物的表面（培养瓶，培养皿的底面）。然后，细胞通过其表面表达的黏附因子与这些细胞外基质结合。

实验室的悬浮细胞如何培养

悬浮细胞是指不需要依赖支持物，可在培养基中以悬浮状态生长的一类细胞，如淋巴细胞和大部分血液系统来源细胞。（如小鼠白血病细胞WEHI-3, 人白血病细胞K-562, HL-60）。工业上也有越来越多的贴壁传代细胞被驯化出来，进行全悬浮的培养。目前在工业中应用的主要有SP2/0、NS0、CHO、BHK和HEK293细胞等，它们主要用于

响细胞生长的常见因素

细胞生长附着物贴壁细胞在正常情况下都会贴壁，但某些细胞本身贴壁不牢或贴壁性差，而包被附着物能够促进细胞的黏附，所以在培养一些特殊细胞时，需要对培养瓶/皿进行包被后使用。常用的基质有多聚赖氨酸（D型、L型）、明胶、胶原蛋白、细胞外基质混合物，培养时可根据需要自行选择。细胞之间的接触程度正常

核酸降解的预防方法

核酸降解本质核酸降解是DNA/RNA分子中的碱基和戊糖间的氮糖苷键，或磷酸二酯键在物理因素、化学因素和生物因素等作用下发生水解，使DNA/RNA链发生断裂。核苷磷酸化酶：能分解核苷生成含氨碱基和戊糖的磷酸酯酶。广泛存在于生物体内,催化的反应可逆。可在核苷水解酶作用下继续分解核苷成嘌呤碱、嘧啶碱和戊糖。

细胞转染效率低解决办法

细胞系的选择细胞系选择有时是实验的需要，有时是实验室条件的限制。如果有选择的余地当然挑个容易做的。越是接近体内的真实情况的原代细胞，通常越是难于伺候。反之亦然。此外细胞本身的特性也是需要考虑的因素。有时需要根据细胞系来选择合适的转染方法;而有时一些启动子在不同的细胞系中表现的功能也不同。这些都

细胞污染后染防治策略

细胞一旦发现有污染出现，应及时对所用试剂和耗材进行清理。耗材可更换新的或者重新高压灭菌，试剂可重新过滤除菌或者更换新批次，操作台和细胞房需用消毒液进行全面清洁消杀后方可复苏新的细胞，以免反复出现污染。1、细胞房环境控制环境要求：洁净区10000级，局部100级，定期进行沉降菌检测环境消毒：

提升细胞转染实验效率方法

细胞转染是细胞生物学和分子生物学的一种常用的技术手段。而转染效率低却是实验童鞋们经常遇到的问题，尤其是原代细胞转染，更是因为难度大，号称谁碰谁死，而令人谈虎色变。不，应该是谈原代细胞色变。那么，当实验进行到转染这一步时有哪些坑要避免?需要注意的因素有哪些呢?一、细胞系的选择细胞系选择有时是

大鼠气道平滑肌细胞培养方法

大鼠气道平滑肌细胞分离自气管组织，气道平滑肌是气管的重要结构组成之一，在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。气道平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排

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