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响细胞生长的常见因素

2022-11-21 10:30:28
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  细胞生长附着物

  贴壁细胞在正常情况下都会贴壁,但某些细胞本身贴壁不牢或贴壁性差,而包被附着物能够促进细胞的黏附,所以在培养一些特殊细胞时,需要对培养瓶/皿进行包被后使用。常用的基质有多聚赖氨酸(D型、L型)、明胶、胶原蛋白、细胞外基质混合物,培养时可根据需要自行选择。

  细胞之间的接触程度

  正常细胞(二倍体)存在贴壁接触抑制,长满后细胞生长停止,而肿瘤细胞等非正常细胞,接触抑制作用较弱,可生长至较高的细胞密度,但某些细胞一旦长过,其损伤难以逆转,所以培养细胞时不建议细胞密度太高。

  培养基PH值

  大多数细胞系在PH7.4左右时生长最好,而常规培养基的指示剂为酚红,所以多数情况下,我们所见的培养基都呈红色,但不同培养基的颜色会有差异,例如DMEM比1640颜色深一点。在培养细胞时,也可以根据培养基的颜色判断细胞状态,如随着细胞生长,pH值会变成黄色。

  气相成分

  大部分培养基适合于95%空气 5%CO2,但有部分培养基例外,如L15培养基适合于100%空气,CO2会导致培养液PH降低(培养液变黄),严重影响细胞生长;若需要用L15培养基培养细胞,但没有100%空气培养箱时,可以拧紧瓶盖或换培养基(效果可能更好)培养。适用于CO2环境的培养基需保持培养瓶透气。

  培养温度

  对于大部分人源细胞和温血动物细胞系来讲,比较适宜的培养温度是37℃,因为这个温度接近体温,但为了安全可以再稍低一些,高于体温的温度要比低于体温的温度更易产生问题。对于鸟类细胞,由于其体温较高,所以培养温度可以设置为38.5℃左右。

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