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2022-12-16
细胞铁死亡的检测方法(4种检测方法)
铁死亡(Ferroptosis )是最近几年才被发现的一种细胞死亡方式,研究中如何检测铁死亡呢?下面我们一起了解几种铁死亡的检测方法。铁死亡常见检测方法:1.CCK-8细胞活性检测推荐指数:★★☆☆☆方法:CCK-8试剂中含有WST–8,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被
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2022-12-15
流式细胞术原理与应用盘点
流式细胞术(Flow cytometry,简称FCM)是一种基于流式细胞仪通过检测偶联荧光信号快速、准确、客观,并且同时检测单个微粒(通常是细胞或者颗粒)的多项特性技术,同时可以对特定群体进行分选。早期流式细胞术主要用于定性,后续慢慢发展为多参数定性、定量以及分选的技术。研究对象:颗粒性物质,如大量的临
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2022-12-15
流式细胞术样品制备方法
流式细胞仪检测分析的对象是细胞或者细胞样颗粒性物质,所以流式细胞术是细胞学的重要研究手段之一。而如何准备合格的样品是包装实验数据准确的基础,下面就讲一下如何制备流式样品。独立细胞样品制备如果研究对象是体外培养的悬浮细胞,则直接收集细胞于离心管中,离心沉淀细胞,然后用PBS重悬沉淀,取适量细胞
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2022-12-14
荧光定量PCR的原理
荧光定量聚合酶链反应(qPCR)是一种用于测定基因表达水平或病毒滴度的常用技术。该技术利用特殊的发光标记探针来检测特定的基因序列或病毒的存在。检测过程中,荧光探针会与基因序列或病毒的 RNA 结合,随着聚合酶链反应进行而发光。荧光强度与所检测到的基因或病毒的量成正比,因此通过测量荧光强度来估算基因表达水
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2022-12-14
细胞迁移与侵袭到底如何区分并有效利用(细胞行为大赏之迁移与侵袭)
细胞迁移是细胞在化学信号(如:趋化因子)的驱使下沿着浓度梯度从一个区域转移到另一区域的运动。细胞侵袭与细胞迁移比较类似,但是“侵袭”需要细胞穿过胞外基质层(ECM)或基底膜基质层(BME),在这个过程中细胞先酶解去除ECM/BME的阻碍,从而在趋化因子浓度梯度驱使下完成从一处到另一处的移动。从名字来看,这两种
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2022-12-14
miRNA与siRNA和shRNA的关系
前面我们谈到了来自基因组暗物质神秘的非编码长链RNA(lncRNA)、非编码环形RNA(ciRNA)、微小的RNA(miRNA),现在我们再来谈谈与微小的RNA(miRNA)有密切关系的小干扰RNA(siRNA)和短发夹RNA(shRNA)。介绍他们之前我们需要先了解下RNA干扰(RNAi)技术。RNA干涉(RNAinterference,RNAi)是有效沉默或抑制目标
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2022-12-14
常用的细胞凋亡检测方法
细胞死亡的方式主要有两种,包括细胞坏死(necrosis)和细胞凋亡(apoptosis)。细胞坏死是早已被认识到的细胞死亡方式,而细胞凋亡是近年来逐渐被认识且越来越受到重视的细胞死亡方式。两种死亡方式最重要的区别是细胞坏死会释放出细胞内溶物,引起炎症反应,而细胞凋亡不会暴露细胞内溶物,一般被吞噬细胞吞噬清除,不
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2022-12-13
细胞培养原代培养操作步骤
原代培养是指直接从组织中分离下来的细胞,放在细胞培养瓶或培养皿中培养的过程。而当细胞不断生长繁殖,细胞间相互紧贴,空间小,密度大,营养物质不足以及代谢物累积,导致细胞生长速度缓慢,状态变差甚至死亡,因此需要传代培养来避免这种情况的发生。原代培养操作步骤原代培养的操作步骤为:取材→分离
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2022-12-12
qPCR荧光定量PCR的Ct值多少比较好,Ct值过大或过小的解决方法
Ct值是荧光定量PCR重要的结果呈现形式。它被用于计算基因表达量差异或者基因拷贝数。那么荧光定量的Ct值多大可被认为是合理?如何保证Ct值的有效范围呢?今天就让小编来为大家解答这个问题。Ct值是什么?qPCR扩增过程中,扩增产物的荧光信号达到设定的荧光阈值时的所对应的扩增循环数(Cycle Threshold)。C代
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