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细胞培养原代培养操作步骤

2022-12-13 10:33:29
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  原代培养是指直接从组织中分离下来的细胞,放在细胞培养瓶或培养皿中培养的过程。

  而当细胞不断生长繁殖,细胞间相互紧贴,空间小,密度大,营养物质不足以及代谢物累积,导致细胞生长速度缓慢,状态变差甚至死亡,因此需要传代培养来避免这种情况的发生。

  原代培养操作步骤

  原代培养的操作步骤为:取材→分离→培养。

  (1)取材:对于不同的组织有不同的取材方法(Uysal et al., 2018;司徒镇强,吴军正., 2007)具体见表1,但均应保持材料的新鲜及严格无菌。

图例

  表1 不同组织的取材方法

  (2)分离:不同的组织类型采用不同的分离方法(Uysal et al., 2018;司徒镇强,吴军正., 2007)具体见图1与表2。

图例

  图1 不同组织类型分离方法

图例

  表2 各种分离方法操作要点

  (3)培养:原代细胞的培养方法分为组织块培养法、消化培养法、悬浮细胞培养法和器官培养。前两种是最简单、常用、成功率高的方法。根据不同分离方法取得的细胞接种到培养瓶后,放置于37℃ CO2培养箱中培养。

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