细胞培养原代培养操作步骤

2022-12-13 10:33:29

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　　原代培养是指直接从组织中分离下来的细胞，放在细胞培养瓶或培养皿中培养的过程。

　　而当细胞不断生长繁殖，细胞间相互紧贴，空间小，密度大，营养物质不足以及代谢物累积，导致细胞生长速度缓慢，状态变差甚至死亡，因此需要传代培养来避免这种情况的发生。

　　原代培养操作步骤

　　原代培养的操作步骤为：取材→分离→培养。

　　（1）取材：对于不同的组织有不同的取材方法（Uysal et al., 2018；司徒镇强,吴军正., 2007）具体见表1，但均应保持材料的新鲜及严格无菌。

　　表1 不同组织的取材方法

　　（2）分离：不同的组织类型采用不同的分离方法（Uysal et al., 2018；司徒镇强,吴军正., 2007）具体见图1与表2。

　　图1 不同组织类型分离方法

　　表2 各种分离方法操作要点

　　（3）培养：原代细胞的培养方法分为组织块培养法、消化培养法、悬浮细胞培养法和器官培养。前两种是最简单、常用、成功率高的方法。根据不同分离方法取得的细胞接种到培养瓶后，放置于37℃ CO2培养箱中培养。