细胞培养与支原体污染

　　支原体对细胞培养会带来严重的危害，同时，它的发生率较高，肉眼不易察觉。

　　有报道，在细胞培养室中，它的平均发生率甚至可高达63%。在生物制品中，它的发生率为1%~3%。

　　细胞培养中支原体的来源

　　细胞培养过程中，污染细胞的支原体主要有5个方面的可能来源：

　　环境

　　被污染的细胞

　　人体表面的携带（如口腔、鼻腔、皮肤等）

　　实验试剂，如培养基、胰酶等

　　未彻底消毒的实验器具

　　其中，环境是造成支原体污染的一个主要原因。

　　特别是多人培养细胞时共用同一培养箱、同一操作台，即使其中一个人很注意，但如果其他实验者给环境中带进支原体，以及培养箱箱门打开频繁，也会显著增加细胞中出现支原体污染的风险。因此环境预防远比在培养液中加入抗支原体药物重要。

　　处理细胞培养工作区域的支原体

　　这里的工作区域包括实验台、超净台、培养箱（水槽除外）、液氮罐、移液器、门把手等细胞培养的环境。

　　使用德国MB公司生产的支原体祛除喷雾或湿巾（品名：Mycoplasma-off™），可在5-10分钟清除支原体，高效快速，操作方便。

　　产品特点及原理：

　　1）快速有效

　　喷雾剂和湿巾中含有支原体专用杀除剂Mynox®，可在几分钟内迅速杀除支原体。

　　与传统的化学试剂熏蒸方法相比，更加安全；与传统酒精处理、紫外线照射方法相比更有效！

　　2）广谱抗菌

　　不仅能根除支原体，而且能有效祛除葡萄球菌、肠球菌、大肠杆菌、奇异变形杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、牛腹泻病毒、腺病毒、多瘤病毒、诺如病毒、牛痘病毒、真菌孢子等。

　　3）无腐蚀性和致癌性

　　乙醇作为溶剂，无腐蚀性和致癌性成分。

　　4）操作简便

　　即用型消毒液，可以快速简单地保持工作区的清洁干净。

　　使用方法及步骤：

　　喷雾剂:

　　注：对于细胞培养箱，内部喷洒支原体祛除喷雾或用湿巾擦拭后，应打开箱门通风至少1小时。如培养箱带热灭活功能，可开启该功能以替代风干。

　　湿巾:

　　对于移液器，门把手，电子设备等，可使用支原体祛除湿巾。擦拭后，应让其被消毒物体的表面保持湿润，再让其自然风干。

　　培养箱水槽和水浴锅中预防支原体污染的方法

　　细胞培养环境中，培养箱水槽、水浴锅经常会有支原体以及各种细菌、霉菌滋生，稍有不慎或清洗不及时，水槽中的水源即会成为细胞污染的重要来源。

　　保持水槽的洁净，对细胞培养的顺利进行非常重要。