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2023-03-19
细胞复苏需要用到哪些细胞培养耗材
细胞复苏是与相反的过程,即是细胞恢复生长的过程,是将冻存在液氮或者-70℃冰箱中的细胞解冻之后重新培养。那么细胞复苏需要用到哪些细胞培养耗材,其步骤又是怎样的呢?细胞复苏与细胞冻存不同,其过程升温要快,防止在解冻过程中水分进入细胞,形成冰晶,影响细胞存活。需要用到的细胞培养耗材包括培养瓶、吸头、
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2023-03-18
细胞实验中提取细胞质和细胞核蛋白的操作步骤
在细胞实验中提取细胞质和细胞核蛋白的操作步骤:1.决定细胞生长状态,细胞生长状态应该是80%或者更好:2.用离心机以1500r/min离心5min3.弃上清液,用等体积的冷PBS洗细胞,像步骤2那样,反复3次4.根据估计的沉淀量加入5倍体积的isotonic lysis buffer到细胞颗粒中,使细胞温和悬浮,尽量避免泡沫5
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2023-03-18
细胞实验中徒手切割法体细胞克隆研究进展
1997年2月,英国<Nature》杂志报道了英国罗斯林研究所的Wilmut等利用绵羊乳腺细胞进行核移植试验,成功地获得了上只体细胞克隆绵羊——多利(Dolly)。这一成果有力地证明了成年哺乳动物的体细胞仍具有发育上的全能性,从而开创了哺乳动物细胞核移植的新里程碑,在生物科学史上具有十分重要的意义。到目前为止,体细胞
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2023-03-17
细胞的冻存和复苏操作步骤
一、原理在不加条件下直接冻存细胞时,细胞内和外环境中的水都会形成冰晶,能导致细胞内发生机械损伤、电解质升高、渗透压改变、脱水、PH改变、蛋白变性等,能引起细胞死亡。如向培养液加入保护剂,可使冰点降低。在缓慢的冻结条件下,能使细胞内水份在冻结前透出细胞。贮存在-130℃以下的低温中能减少冰晶的形成。
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2023-03-17
目前制作脑梗塞动物模型的几种方法
1.目前脑梗塞动物模型制作方法有以下几种。1.1 光化学法腹腔内麻醉后,消毒并纵向切开头皮,暴露右侧颅骨,小心分离骨膜以免损伤颅骨表面影响其透光性。颅骨表面覆以中间带圆孔的避光纸,其下为感觉运动皮质中枢。从股静脉缓慢注入2%玫瑰红B后,将大鼠固定于立体定位仪上,冷光源探头贴近暴露的颅骨。此法优点在
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2023-03-17
细胞冻存和复苏实验实验步骤
细胞冻存和复苏可以用于:(1)用于生物学保种;(2)用于医学上研究干细胞;(3)用于传代培养。实验方法原理:细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样能够大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存大多数都采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质能提升细胞膜对水的通透性,加上缓慢冷冻可使细胞内的
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2023-03-17
细胞周期同步化几种常用的方法
在一般培养条件下,群体中的细胞处于不同的细胞周期时相之中。为了研究某一时相细胞的代谢、增殖、基因表达或凋亡,故常需借助某种自然或人工的实验手段,使细胞群体中处于细胞周期不同时相的细胞停留在同一时相的现象,这就是细胞同步化技术。由于细胞群体受到多种条件限制,对结果有很大影响,所以一般采用人工同
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2023-03-16
如何判断细胞是否已贴壁
1.培养液清亮透明不浑浊,对光观察培养瓶底,可见有成片物质附着,即为细胞,可以证明细胞已经贴壁。如果此时培养液颜色偏红不黄,说明营养还可以。2.培养液偏红色,但是浑浊,说明细胞没有贴壁(是细胞悬浊液,当然不清亮透明),且没有微生物污染,因为污染后培养液常迅速变黄。3.培养液浑浊,发黄,说明没有贴
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2023-03-16
如何看培养的细胞的生长状况
具体要看你培养的是什么细胞了,贴壁细胞长满至培养瓶底部80%左右就可以传代了,一般来说隔一天换一次培养基即可。如果细胞长得不好的话,一般增殖比较慢,贴壁不好,悬浮的死细胞比较多。对于悬浮培养的细胞要根据具体细胞的特性来判断长得好不好了,例如看细胞的形态是否正常。生长正常的细胞在显微镜下,培养液干
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