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如何判断细胞是否已贴壁

2023-03-16 10:39:00
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  1.培养液清亮透明不浑浊,对光观察培养瓶底,可见有成片物质附着,即为细胞,可以证明细胞已经贴壁。如果此时培养液颜色偏红不黄,说明营养还可以。

  2.培养液偏红色,但是浑浊,说明细胞没有贴壁(是细胞悬浊液,当然不清亮透明),且没有微生物污染,因为污染后培养液常迅速变黄。

  3.培养液浑浊,发黄,说明没有贴壁且很可能已被污染,细胞不会存活,尽快丢掉。

  贴壁细胞和悬浮细胞在显微镜下有什么区别

  一、贴壁生长的细胞核悬浮生长的细胞都有很多种。

  活体体内的细胞当离体置于体外培养时大多数均以贴壁方式生长,主要包括正常细胞和肿瘤细胞,比如成纤维细胞,骨骼组织(骨及软骨),心肌与平滑肌、肝、肺、肾、乳腺皮肤神经胶质细胞,内分泌细胞,黑色素细胞及各种肿瘤细胞等。

  少数细胞在体外培养是悬浮生长,包括一些取自血、脾或骨髓的培养细胞,尤其是血液白细胞以及癌肿细胞。

  二、贴壁细胞与悬浮细胞在培养条件上的区别

  贴壁细胞要加血清,不贴壁的可以不加血清。

  三、贴壁细胞与悬浮细胞在培养方式上的区别

  不贴壁的一般用各种摇瓶和反应器培养,贴壁的一般用方瓶或孔板培养,使用微载体时也可以用反应器培养。

  四、贴壁细胞和悬浮细胞在传代方法上的不同

  由于贴壁细胞贴壁生长,接触抑制,长满一瓶后贴壁较紧,不易取出。这时必须用胰蛋白酶或者胶原蛋白酶处理,使其分散开后取出,然后在放入新的培养瓶中培养。

  悬浮细胞其实也有贴壁现象,只是贴壁不牢。可以直接用吹打发是细胞掉落下来,进行传代。

  五、贴壁细胞与悬浮细胞在显微镜下的区别

  贴壁细胞分为两种,上皮细胞型和成纤维细胞型,在显微镜下观察时,贴壁细胞在瓶底伸展并延伸成梭型或不规则的三角形或扇形,而且晃动培养液时,细胞不动。

  悬浮细胞漂在培养液中,呈圆形,晃动培养液时细胞也随着漂动。

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