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动物细胞培养方法

2022-12-09 10:39:32
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  动物细胞培养是指在人工培养基上培养活细胞的过程。它是细胞生物学研究的基础,为研究细胞的生长、分化、代谢、发育、遗传和肿瘤等提供了重要平台。

  ①动物单细胞的制备动物单细胞制备的方法有酶法、机械法和螯合剂解离法。目前最常用的方法是酶法,即将动物胚胎或幼龄动物的器官、组织取出后,放在含抗生素的平衡盐溶液中,在无菌条件下,用胰蛋白酶或胶原酶解离主要成分为胶原蛋白、层粘连蛋白、纤粘连蛋白和弹性蛋白的细胞间基质,使组织分散,获得单个细胞。

  ②细胞培养动物细胞培养所用的液体培养基与植物细胞培养所用的培养基在成分上有所不同,条件更为苛刻,培养液中除了含有葡萄糖、氨基酸、无机盐和维生素之外,还需要动物血清。培养液pH7.2~7.4,培养设备为CO。孵箱,温度37℃左右。

  单细胞培养的传统方法有微室培养法、灌注小室培养法、旋转管培养法和平板培养法等。动物细胞微室培养法、平板培养法与植物细胞微室培养、平板培养的方法类似。

  灌注小室培养法是将细胞接种于上下两个盖玻片和金属圈密闭形成的小室中,在小室的两侧有液体流入和流出的小口,以保证培养液能够供应的一种较原始的培养方法。

  旋转培养法指把动物单细胞接种在管状培养器皿中,然后固定于特定旋转装置上进行培养。该方法可以明显促进培养器皿内外气体的交换。

  在动物细胞的大规模培养技术中,除了血液白细胞、淋巴组织细胞和某些肿瘤细胞可以采用悬浮培养之外,其他大部分哺乳动物细胞只有附着在固体或半固体表面才能生长,所以一般采用微载体培养或多孔载体培养等方法,在此不做介绍。

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