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分子实验-免疫染色IHC 染色(免疫组织化学 (IHC) 染色方法)

2022-01-12 10:23:45
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  免疫组织化学 (IHC) 染色方法:

  • 根据与抗体结合的生物素不同,IHC 染色方法可分为免疫荧光法、免疫酶学染色法和亲和组织化学法。

  • 根据不同的程序,免疫组化染色可分为直接染色(一步染色)和间接染色(二步、三步或多步染色)亚型。

  免疫组化染色(免疫荧光):

免疫染色

  免疫荧光染色是最早的免疫组化染色方法。具有抗原抗体结合反应的基本原理,在荧光显微镜下,特定波长的激发光激活后,抗原与抗体偶联的荧光染料被可视化。免疫荧光染色法由于灵敏度高、特异性强、方便快捷,已广泛应用于医学分析和诊断。

  免疫组织化学染色(免疫酶学染色):

  在免疫酶染色中,酶标抗体用于结合组织样本或培养细胞中的特定抗原。加入酶底物后产生不溶性或高电子密度颗粒,可在光学显微镜或电子显微镜下定位。

  与免疫荧光染色相比,免疫酶学染色定位更准确,对比度更好,样本可长期保存。

  免疫组化染色(免疫胶体金技术):

  免疫胶体金技术是一种以胶体金为标志物的技术。这种特殊的金属颗粒是金的水溶胶形式,可以快速稳定地结合蛋白质。而且,胶体金对天然蛋白质的生物活性几乎没有影响。因此,胶体金是一种理想的材料,可以与一抗、二抗或其他一些可以结合IgG(如葡萄球菌A蛋白)的蛋白质结合,以定位切片组织或培养细胞中的某些抗原。由于胶体颗粒大小的差异及其较高的电子密度,免疫胶体金技术适用于免疫电子显微镜和光学显微镜下的单标记或多标记检测。


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