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分子实验-免疫组织学名词解释(什么是免疫组织化学)

2022-01-12 10:19:00
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  免疫组织学是免疫学的一个分支,它处理免疫学方法在组织学中的应用。

  免疫组织化学(一种基于形态学的技术)的快速发展是通过检测系统的改进和越来越多的敏感和特异性抗体实现的,这些抗体允许将该技术应用于福尔马林固定、石蜡包埋的组织。热诱导抗原修复的引入是补充这些发展的一个重要里程碑,因此免疫组织化学已成为形态学诊断不可或缺的辅助手段。尽管这种辅助染色最初是以定性方式使用的,但围绕影响福尔马林固定、石蜡包埋组织中抗原保存的许多变量的问题并不是主要问题,实验室努力优化他们加入和处理的材料的染色方案。 个性化医疗和靶向癌症治疗的出现要求对染色反应产物进行定量,并要求标准化免疫染色过程。对影响在福尔马林固定、石蜡包埋的组织中显示抗原的能力的变量进行更仔细的检查发现了许多重要的变量,特别是在检测的分析前阶段,这些变量超出了加入实验室的控制范围。尽管分析因素有可能被标准化,但包括固定和抗原修复在内的许多关键程序的作用尚不完全清楚。包括阈值和截止值在内的分析后过程需要达成共识和标准化,很明显,其中一些目标可以通过与癌症诊断和治疗相关的国家和国际组织的指导来实现。随着作为许多遗传异常的替代标志物的能力,免疫组织化学进入了一个新时代,更好地了解该技术的一些基本机制的需求变得更加紧迫,开发真正的定量分析势在必行。人们也越来越认识到,该技术突出了反映精细定位的细胞器和组织结构的染色模式,这些在常规染色中是不明显的,从而为形态学诊断增加了进一步的维度。

  大约 70 年前首次引入免疫组织化学时,在诊断病理学中的应用范围有限,但随后对程序的改进以及随之而来的不断增加的抗体范围的开发导致灵敏度提高,从而使免疫组织化学染色可以应用于常规制备福尔马林固定、石蜡包埋的组织。使用福尔马林固定、石蜡包埋的组织的能力和该技术的敏感性使染色能够精确定位到特定的细胞结构和细胞器。因此,已提出“免疫组织学”1 和“免疫形态学”作为更合适的术语,以强调主要基于形态学研究的这一基本属性。

  免疫组织化学技术利用抗体通过比色法或荧光法原位探测和观察细胞抗原。免疫组化师有许多标准工具来优化微粒分析物的检测。直接方法使用标记试剂,例如荧光标签或酶标记抗体,无需进一步的抗体相互作用即可观察到。间接方法增加了测定步骤的数量,但使用户能够放大他们的测定以提高灵敏度。为了获得最大的灵敏度,应使用生物素-链霉亲和素系统。

  另一种相关技术,ELISpot(酶联免疫斑点)测定法也提供了一种检测固体支持物上单细胞中抗原或抗体的方法。上述所有技术都依赖于标记抗体或偶联物作为信号分子来检测最初与固相结合的蛋白质。用合适的显色底物检测酶标记的试剂,将其转化为有色产物。产生的信号强度与结合到表面的测量抗原量成正比。

  组织化学

  组织化学似乎是一个非常专业的领域。生物化学和组织化学等医学科学已经变得如此先进,以至于在组织化学等看似专业的领域中出现了更多的子学科。这些科目通常不包括在学校或大学水平的课程中,也不会在介绍生物学的水平上讨论,但他们可能会对进一步阅读科学科目的学生感兴趣,以决定在更高级的水平上学习哪些主题。

  • 细胞化学——研究活(生物)细胞内的化合物的作用。

  • 免疫组织化学——利用抗体与生物组织中的抗原特异性结合的原理,检测完整生物组织切片中抗原的过程(即,每个细胞都被组织结构和正常存在于完整组织中的其他细胞包围的生物组织) .

  • 免疫细胞化学- 使用针对细胞中特定肽或蛋白质抗原的抗体的过程,然后可以使用各种方法检测结合的抗体。

  注意:免疫细胞化学不同于免疫组织化学,因为在免疫细胞化学的情况下,所研究的组织已经去除了大部分或全部周围的细胞外基质。这意味着免疫细胞化学可用于研究在培养物中生长、从悬浮液中沉积或从涂片中提取的细胞。

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