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2022-07-13
荧光定量PCR原理，通过标准曲线对未知模板进行定量分析的两种方法
荧光定量PCR原理荧光定量PCR技术，是指在普通PCR技术的基础上，在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。主要有两种方法：1、染料法：SYBR Green 染料在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发
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2022-07-12
什么是聚合酶链式反应及其原理（PCR的原理）
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链，在DNA聚合酶的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。在实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，加入设计引物，DNA聚合酶、dNTP
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2022-07-12
pcr扩增仪操作过程及步骤
PCR(Polymerase Chain Reaction)，是指在DNA聚合酶催化下，以母链DNA为模板，以特定引物为延伸起点。通过变性、退火、延伸等步骤,体外复制出与母链模板DNA互补的子链DNA的过程。经典的PCR扩增反应分为三步：1、高温变性：模板DNA经加热至95℃左右一定时间后，使模板DNA双链解离，使之成为单链，以便它与引物结
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2022-07-12
pcr过程基本步骤（pcr三个基本步骤）
PCR 全过程包括三个基本步骤,即双链 DNA 模板加热变性成单链(变性);在低温下引物与单链DNA互补配对(退火);在适宜温度下 Taq DNA 聚合酶以单链 DNA 为模板,利用4种脱氧核苷三磷酸(dNTP)催化引物引导的 DNA 合成(延伸)。这三个基本步骤构成的循环重复进行,可使特异性 DNA 扩增达到数百万倍。该过程见图1。图1PCR 原理
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2022-07-12
怎么做好ELISA实验？ELISA技术各步骤的操作要点解析
优质的试剂，良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异，国内医学检验一般均用板式点。本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点，珠式、管式及磁性球ELSIA，国外试剂均与特殊仪器配合应用，两者均有详细的使用说明，严格遵照规定操作，必能得出准确
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2022-07-11
细胞培养时经常会遇见的一些问题（细胞培养注意事项及常见问题解答）
养细胞是一件戳心戳肺的事情，你要像对待你女朋友那样仔细的爱护她，呵护她。如果你能意识到这一点的话，相信你的细胞肯定能养得好，下面我就向大家简单介绍一下大家在细胞培养时经常会遇见的一些问题。1、如何选用特殊细胞系培养基？培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M1
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2022-07-11
细胞铺板的3种手法（细胞铺板的技巧）
细胞铺板是细胞实验中最常见又必须掌握的一门技术，看起来是非常简单的一项操作，但其实却经常会遇到：细胞分布不均匀的情况。要知道把用于实验的细胞铺的均匀且密度适宜，不仅看起来赏心悦目，更是决定了我们实验的稳定性。但是后来才发现，其实细胞铺板是有规律可循的，今天我们就来了解一下：细胞铺板的技巧。我们先
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2022-07-11
细胞侵袭Transwell 实验实验原理及步骤
做肿瘤研究的人，很少有不知道 transwell 实验的，它是用来研究肿瘤细胞的迁移侵袭转移情况的一种简便快捷的实验方法，还可以构建两种细胞的共培养体系以及趋化性试验。今天咱们就来讲讲怎么做肿瘤细胞的侵袭转移实验。实验原理01什么是Transwell侵袭实验Transwell侵袭实验是用一层聚碳酸酯膜将高营养的培
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2022-07-11
做好肿瘤侵袭、迁移实验方法及步骤
体外：细胞划痕实验Transwell体内：裸鼠尾静脉注射1细胞划痕实验细胞划痕实验是一种简单易行的检测细胞运动的方法，实验成本低，可以检测贴壁生长肿瘤细胞的迁移能力。实验优点：1）在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程。2）适合研究细胞与胞外基质（ECM）、细胞与细胞之间相
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