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提升细胞转染实验效率方法

细胞转染是细胞生物学和分子生物学的一种常用的技术手段。而转染效率低却是实验童鞋们经常遇到的问题，尤其是原代细胞转染，更是因为难度大，号称谁碰谁死，而令人谈虎色变。不，应该是谈原代细胞色变。那么，当实验进行到转染这一步时有哪些坑要避免?需要注意的因素有哪些呢?一、细胞系的选择细胞系选择有时是

大鼠气道平滑肌细胞培养方法

大鼠气道平滑肌细胞分离自气管组织，气道平滑肌是气管的重要结构组成之一，在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。气道平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排

细胞培养时怎么对器皿表面进行处理

在实验室中，我们一般会用聚丙乙烯制成的无菌培养瓶、培养皿或多孔板来培养细胞。它们透光性好、生长面平滑、能够提供质地均匀、重复性好的单层培养物。然而由于是人工合成的，因此聚丙乙烯是疏水性的，表面不适宜细胞生长，故用于组织培养的塑料，都要经过γ射线照射、化学处理或电离辐射，以产生亲水的带电表面，使细

原代角质形成细胞的分离培养方法

原代细胞在相关细胞实验使用过程中越来越多，人们不再单单趋于使用细胞系进行实验研究，因为细胞系常常由于体外长期培养，而容易丢失原有的生物学特性，对药物处理的反应差距越来越大。原代细胞刚从组织中分离开，生物学特性未发生很大变化，仍保留原来的遗传特性，也*为接近和反应体内生长特性，原代细胞的活力和生

怎么培养大鼠平滑肌细胞

一、器械显微器械：眼科剪一把，直弯眼科镊各一把，细结镊一把，手术刀一把，针头诺干杀老鼠器械：手术剪一把，大镊子一把，弯眼科镊一把，组织钳一把，50ml烧杯一个（锡纸包好）另外：10ml离心管两个，培养皿两个，10ml的瓶子三个，小滤器两个，硅胶板一块，培养瓶盖子诺干二、试剂D-HANKS

如何提高细胞的转染效率

有的同学做了转染，连接目的基因的载体带荧光，转染后48小时在荧光显微镜下观察，却发现只有约百分之15左右的荧光，问该怎么提高转染效率?有没有必要接着往下做筛选?还是重新转染一次?1、如果要是做稳定筛选的话，15%的转染率应该够了。提高转染效率的话，可以适当降低转染时细胞的密度(我试过60～70%的密度

细胞传代密度过高和过低解决方案

传代密度过高一旦细胞养太久至融合度过高（>90%）才传代，容易使细胞产生老化现象，甚至是堆叠，再消化细胞时不易吹打成单颗细胞，即便再重新铺盘传代，细胞也无法回到原本的特性了。（如：单层细胞，没长满就发生堆叠现象）。解决方案尽量避免融合度过高，镜下观察融合度约达到80%即可传代分盘。细

细胞复苏的原则：快速融化

细胞快速融化必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。实验前准备将水浴锅提前预热至37℃。细胞实验室进行常规消毒，用75％酒精擦拭紫外线照射40min的超净工作台台面，保证无菌。在超净工作台中按次序摆放

大鼠星型胶质细胞培养胰酶消化法

材料与仪器SD大鼠苯巴（匕匕）妥解剖液胰蛋白酶 Dnase DM培养液离心管培养箱手术器材步骤一、取14.5d SD大鼠一只。二、苯巴（匕匕）妥0.5 ml 腹腔注射，待麻醉后置于手术台上，酒精棉球消毒皮肤，开腹取出子宫（约12-14个），放入解剖液中，剖开子宫，取出胚胎，放入解剖液中，在耳眼之

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