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2023-04-22
细胞免疫荧光实验注意事项盘点
细胞免疫荧光实验注意事项盘点1、建议细胞直接种孔板,采用倒置荧光显微镜拍照,这样可以避免最后挑片时造成划片或细胞片破损以及最后封片可能造成滑片等结果;2、若实验室只有正置荧光显微镜,则需要将细胞植于细胞爬片。1)建议直接购买处理过的细胞爬片;2)若只有普通细胞爬片,可以先将爬片于浓酸
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2023-04-22
如何做好免疫荧光实验
免疫荧光是标记免疫技术发展最早的一种,它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术,通过将抗体与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。免疫荧光步骤包括,细胞固定和通透,封闭,孵育一抗,二抗等。除了这些基本步骤,以下斗前建议可以帮助您获得更好的实验结果。
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2023-04-21
直接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的异同
直接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的异同1组织用4%多聚甲醛固定6-8小时,转至20%蔗糖搜尘溶液至组织沉底。2冰冻切片8-10μm,推荐瑞沃德冷冻切片机,温度稳定,切片质量高。室温放置30分钟以上防脱片,-20℃保存。从冰箱拿出的冰冻切片在室温放置30分钟以上再进行免疫荧光。31xPBS洗3次,每次3-5分钟。
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2023-04-21
蛋白质沉淀与变性的关系
蛋白质沉淀与变性的关系1、性质不同蛋白质从溶液中析出的现象,称为蛋白质的沉淀。蛋白质的变性(denaturation),在某些物理和化学因素作用下,其特定的空间构象被破坏,即有序的空间结构变成无序的空间结构,从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失,称为蛋白质的变性。2、结果不同蛋白质沉淀,破
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2023-04-21
DNA与蛋白质相互作用的研究方法有哪些
研究DNA-蛋白质相互作用的实验方法主要包括:a、凝胶阻滞实验; b、DNase 1 足迹实验;c、甲基化干扰实验; d、体内足迹实验; f、拉下实验。研究蛋白质/ 核酸相互作用近期采用的新技术有:核酸适体技术、生物信息学方法、蛋白质芯片技术以及纳米技术等。(1) 利用有色荧光蛋白标芦册记技术进行蛋白定位研究
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2023-04-21
几种常用的蛋白标签的功能和优点
重组蛋白表达技术现已经广泛应用于生物学各个具体领域。特别是体内功能研究和蛋白质的大规模生产都需要应用重组蛋白表达载体。上周小知了给大家简单介绍了大肠杆菌原核表败闷行达的整体思路,这里给大家简要介绍几个常用的蛋白标签及其功能和优点。GST(谷胱甘肽巯基转移酶) 标签蛋白本身是一个在解毒过程中起到重
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2023-04-20
支原体污染检测方法有哪些
支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(最小直径0.2um)并独立生活的微生物.约有1%可通过滤菌器。支原体无细胞壁形态呈高度多形性.可为圆形、丝状或梨形。支原体形态多变,在光境下不易看清内部结构。多数支原体适合于偏碱条件下生存(PH7.6-8.0),对酸耐受性差。对热比较敏感,对一般抗生素不敏感。支原体污染细胞后.培
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2023-04-20
如何判断细胞是否被污染?
发生污染,既耽误时间又是一个灾难,熟练的无菌操作能避免许多问题,但早期检测污染是一种可以预警的方法。对于培养箱中的每瓶细胞都要注意观察,要养成习惯,每次打开培养箱时,迅速看看有没有发生污染。细菌、酵母、真菌、霉菌、支原体以及其他的培养细胞都可能引起污染。怎样识别污染一、肉眼观察 ,把培
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2023-04-20
常见细胞培养污染判别有哪些方法,细胞培养污染判别及应对措施
污染是细胞培养中一个大敌,一旦污染,前功尽弃。 决定要进行细胞培养,首先-定要有强烈的无菌意识,操作中要遵守严格的操作规程,不要怕麻烦,越细心越好。一般情况下,如果你的细胞被细菌污染了,培养皿或瓶中的细胞状态很快就会发生变化,表现为胞浆中出现大量的颗粒,液体浑浊、培养基PH下降,变成黄色,贴壁
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