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直接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的异同

2023-04-21 10:37:07
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  直接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的异同

  1组织用4%多聚甲醛固定6-8小时,转至20%蔗糖搜尘溶液至组织沉底。

  2冰冻切片8-10μm,推荐瑞沃德冷冻切片机,温度稳定,切片质量高。室温放置30分钟以上防脱片,-20℃保存。从冰箱拿出的冰冻切片在室温放置30分钟以上再进行免疫荧光。

  31xPBS洗3次,每次3-5分钟。

  4用2%BSA室温或37℃封闭1小时。

  5一抗4℃孵育过夜。1xPBS洗3次,兆含每次3-5分钟。

  6二抗室温或37℃,避光孵育1小时。1xPBS洗3次,每次世猜禅3-5分钟。

  7DAPI染色。1xPBS洗3次,每次3-5分钟。

  8滴加防淬灭剂,封片。

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