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2023-05-17
细胞冻存有哪些注意事项(细胞冻存需要注意哪些事项)
细胞冻存是细胞保存的重要方法,在生化及临床研究工作中十分重要。细胞冻存是指利用冻存技术将细胞置于低温环境中,使细胞代谢率降低,暂时脱离生长状态,并将其细胞生物学特性保存起来,然后在需要的时候再复苏细胞的过程。所以,细胞冻存包括冻存和复苏两个环节。细胞冻存可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意
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2023-05-16
如何鉴别DNA是否受到其它DNA的污染
如果此DNA较小,直接PCR跑电泳,看条带是清晰的一条还是有多条如果DNA较大,酶切以后用一段原有DNA中不存在的序列DNA做引物,PCR,电饥并泳烂闹迹看是否有条带有弯厅:污染了细胞污染永恒定律:无论什么细胞只要是不重要的细胞污染了,立刻加84弃之,重新复苏新冻存管培养;实在需要挽救的请参考以下:细菌污染:
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2023-05-16
流式细胞术检测细胞凋亡(Annexin V-FITC/PI 双染法)
流式细胞术检测细胞凋亡(Annexin V-FITC/PI 双染法)一、原理1、Annexin V-FITC在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和
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2023-05-16
新收到的新细胞怎么鉴定是否有污染
如何鉴定收到的新细胞是否有污染:一、肉眼观察以下几项:1. 细胞瓶身:如果瓶身上没有裂缝,正常;如果瓶身上有裂缝,则污染几率非常大。2. 培养基颜色:如果培养基颜色是红色或者粉色,正常;如果是橙色,则可能是污染或者细胞过密;如果是黄色,则污染几率非常大。3. 培养基澄清度:如果
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2023-05-16
原代细胞的取材和分离方法
将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。原代细胞培养的步骤一般是:取材→分离→培养和维持,今天我们重点介绍原代细胞的取材和分离方法。一、取材人和动物细
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2023-05-15
细胞复苏的操作步骤及注意事项有哪些
平时研究用的细胞,有需要冷冻保存。冷冻的过程称为冻存,和冻存对应的过程,称为复苏,通俗地说就是把冻上的细胞化开。细胞复苏是一简单的试验操作,但操作中有许多需要注意的事项,在实验操作中注意细小问题,才能使复苏后的细胞状态保持良好。一、细胞复苏实验:1、主要器材:一次性滴管、打火机、酒精灯、大
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2023-05-15
细胞增殖检测方法有哪些
细胞增殖检测的应用相当广泛,不论是测试药物试剂还是生长因子的效果,不论是评估细胞毒性还是分析细胞活性状态,您都可能会用到它。细胞增殖检测一般是检测分裂中的细胞数量或者细胞群体发生的变化。细胞增殖检测主要分为四类:DNA合成检测、代谢活性检测、细胞增殖相关抗原 检测和ATP浓度检测。在这些方法中作何选择
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2023-05-15
细胞污染挽救(细胞被污染了怎么办)
对于贴壁生长的细胞,相对来说比较简单但也很麻烦。以下我主要讨论贴壁生长的细胞。在讨论之前,大家首先要有一个概念,即洁净区,并不是没有细菌,而是细菌的数量非常少,国家标准100级的洁净标准是浮游菌数不得超过5个每立方米,沉降菌数不得超过1个每培养皿.而国外的标准比我国的还要高一点,要求的数量更少。
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2023-05-15
原代细胞的培养技巧
原代细胞的培养也叫初代培养,是从供体取得组织细胞在体外进行的首次培养,是建立细胞系的第一步,是一项基本技术。原代细胞因刚从组织中分离开,生物学特性未发生很大变化,仍保留原来的遗传特性,也最接近和反映体内生长特性,适宜用于药物敏感性试验、细胞分化等实验研究。原代细胞往往有多种细胞组成,比较混杂,即
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