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新收到的新细胞怎么鉴定是否有污染

2023-05-16 10:22:38
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  如何鉴定收到的新细胞是否有污染:

  一、肉眼观察以下几项:

  1. 细胞瓶身:

  如果瓶身上没有裂缝,正常;如果瓶身上有裂缝,则污染几率非常大。

  2. 培养基颜色:

  如果培养基颜色是红色或者粉色,正常;如果是橙色,则可能是污染或者细胞过密;如果是黄色,则污染几率非常大。

  3. 培养基澄清度:

  如果培养基澄清,正常;如果有少许漂浮物,则可能是污染或者有细胞凋亡;如果培养基很浑浊,甚至出现絮状物,则污染几率非常大。

  二、进行显微镜下观察(通常观察前需先静置细胞1-2h)

  显微镜下可以清晰观察到细胞是否有菌类污染,菌类污染通常分为杆菌、球菌和霉菌,为了方便大家分辨,我特地找了之前收到有典型污染的细胞照片,希望能帮助大家判断。

  1. 杆菌

  常见的有大肠杆菌,长度通常在2-5um左右。

  2. 球菌

  常见的有葡萄球菌,直径通常在1-2um左右。

  3. 霉菌

  常见的有毛霉,菌丝宽2-10um左右,长度短则几十um,长则可达几mm。

  需要提醒的是,因为运输过程中细胞离开了其正常生长所需要的环境,部分细胞会出现凋亡或产生细胞碎片,容易误认为是细菌污染;另外培养基中的杂质纤维也容易误认为是霉菌污染,具体区分方法如下:

  1.细胞碎片和杆菌

  细胞碎片只会随着细胞状态的变差而变多,通常增长不快;杆菌则增殖非常快,以常见的大肠杆菌为例,常温25℃增殖1倍需要40min左右(此数据可查阅相关文献验证),培养基很快变黄且浑浊。

  2.凋亡细胞和球菌

  凋亡细胞通常只比正常细胞小一点,只会随着细胞状态的变差而变多,通常增长不快;球菌则要小很多,且成串或成团,培养基很快变黄且浑浊。

  3.杂质纤维和霉菌

  杂质纤维通常是过滤时残留的滤纸纤维,或者是酒精棉球上的棉纤维,在不开瓶处理的情况下其数量不会增长;霉菌的话虽然增殖速度没有杆菌和球菌快,但还是会有明显增殖。

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