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2022-08-23
蛋白纯化分离的实验方法有哪些(蛋白纯化分离的实验总结)
分离纯化方法已成为目前的研究热点之一。蛋白质的分离纯化工作较为复杂,从细胞中提取的蛋白质或从含有蛋白质的溶液中经过沉淀、梯度离心、盐析等方法得到的蛋白质经常含有杂质。要去除这些杂质,同时又要保持蛋白质的生物学活性,如酶的催化活性,就需要根据不同的蛋白质制定出相应的策略,采用不同的方法。蛋白纯化分
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2022-08-23
怎么选择蛋白纯化标签?
在进行蛋白表达时,选择合适的标签有利于蛋白的纯化,促进蛋白的可溶性,因此了解几种常用的蛋白纯化标签很重要。一般来说,常用的蛋白纯化标签主要有His tag、GST tag、MBP tag、NusA tag、Strep tag,那么这些蛋白纯化标签有什么不同之处呢?His tag(组氨酸标签)融合蛋白是目前最常见的表达方式,其优点
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2022-08-23
动物实验该分几组?如何进行分组?
在探索新的医疗方法时,研究者们总会以实验室中的临床前研究作为开端。在实验室中,通过动物进行的实验至关重要,研究者们通过动物实验了解药物安全性和有效性的基本信息,它的结果也直接决定着试验药物是否可以进入临床试验阶段。进行动物实验,常常需要把选择的动物按需要分成若干组。实验动物分组是实验设计中的
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2022-08-22
细胞死亡的检测方法分享(鉴定细胞是否死亡的方法)
如果我们确定了临床方向,以及想要研究的细胞类型,那么第一件事并不是急着检测各种程序性死亡的标志物,而是先进行观察,然后排除干扰因素。举个例子,假设我想要做肺癌的化疗耐药,并且选择了肺癌肿瘤细胞作为目标细胞类型,那么首先我要确定化疗耐药的肺癌细胞是通过加快增殖,还是通过抑制死亡来实现耐药的?具
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2022-08-22
实验性牙周炎动物模型的构建方法(常见的牙周炎动物模型有哪些)
牙周炎是一种病因较复杂的口腔常见病,可导致牙龈组织逐渐丧失,逐渐损害牙周韧带及牙槽骨,是造成成年人牙齿丧失的最主要原因。目前普遍认为菌斑微生物及其产物在局部的堆积和浸润是牙周炎发生、发展的关键因子,而机体对此的应答反应则是决定牙周炎发生与否、发病速度、病变程度以及范围的重要因素。研究疾病
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2022-08-22
胶回收和PCR 产物回收技巧(PCR 产物回收的详细方法和步骤)
胶回收和PCR 产物回收技巧(PCR 产物回收的详细方法和步骤)1、提高胶回收量的技巧1) 增加电泳时的上样量。2) 电泳缓冲液用新鲜配制的。3) 切胶时尽量只切有条带的胶,减小切胶体积:含目的片断很少的胶就不要要了,不然影响回收率。4) 把切的两块或多块胶融化后,无论多大的体积都用一个管子,转移到同一
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2022-08-22
细胞划痕传统实验方法(细胞划痕实验结果与分析)
细胞划痕实验(Wound Healing)是一种操作简单,经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外实验方法。这种方法的原理是,当细胞长到融合成单层状态时,在融合的单层细胞上划痕工具制造一个空白区域,空白区域的细胞被机械力去除掉了,通过一段时间的培养,观察细胞向无细胞区域迁移的情况,通过测量细胞的迁移距反映细胞
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2022-08-21
根据蛋白质溶解度不同的分离方法
根据蛋白质溶解度不同的分离方法(1)蛋白质的盐析中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响,一般在低盐浓度下随着盐浓度升高,蛋白质的溶解度增加,此称盐溶;当盐浓度继续升高时,蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出,这种现象称盐析,将大量盐加到蛋白质溶液中,高浓度的盐离子(如硫酸铵的SO4和NH4)有很强的水化力
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2022-08-21
蛋白质纯化(包括酶)的提取方法
大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液,少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、丙酮、丁醇等有机溶剂中,因些,可采用不同溶剂提取分离和纯化蛋白质及酶。(1)水溶液提取法稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂,通常用量是原材料体积的1-5倍,提取时需要均匀的搅
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