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细胞培养时怎么对器皿表面进行处理

在实验室中，我们一般会用聚丙乙烯制成的无菌培养瓶、培养皿或多孔板来培养细胞。它们透光性好、生长面平滑、能够提供质地均匀、重复性好的单层培养物。然而由于是人工合成的，因此聚丙乙烯是疏水性的，表面不适宜细胞生长，故用于组织培养的塑料，都要经过γ射线照射、化学处理或电离辐射，以产生亲水的带电表面，使细

原代角质形成细胞的分离培养方法

原代细胞在相关细胞实验使用过程中越来越多，人们不再单单趋于使用细胞系进行实验研究，因为细胞系常常由于体外长期培养，而容易丢失原有的生物学特性，对药物处理的反应差距越来越大。原代细胞刚从组织中分离开，生物学特性未发生很大变化，仍保留原来的遗传特性，也*为接近和反应体内生长特性，原代细胞的活力和生

怎么培养大鼠平滑肌细胞

一、器械显微器械：眼科剪一把，直弯眼科镊各一把，细结镊一把，手术刀一把，针头诺干杀老鼠器械：手术剪一把，大镊子一把，弯眼科镊一把，组织钳一把，50ml烧杯一个（锡纸包好）另外：10ml离心管两个，培养皿两个，10ml的瓶子三个，小滤器两个，硅胶板一块，培养瓶盖子诺干二、试剂D-HANKS

如何提高细胞的转染效率

有的同学做了转染，连接目的基因的载体带荧光，转染后48小时在荧光显微镜下观察，却发现只有约百分之15左右的荧光，问该怎么提高转染效率?有没有必要接着往下做筛选?还是重新转染一次?1、如果要是做稳定筛选的话，15%的转染率应该够了。提高转染效率的话，可以适当降低转染时细胞的密度(我试过60～70%的密度

细胞传代密度过高和过低解决方案

传代密度过高一旦细胞养太久至融合度过高（>90%）才传代，容易使细胞产生老化现象，甚至是堆叠，再消化细胞时不易吹打成单颗细胞，即便再重新铺盘传代，细胞也无法回到原本的特性了。（如：单层细胞，没长满就发生堆叠现象）。解决方案尽量避免融合度过高，镜下观察融合度约达到80%即可传代分盘。细

细胞复苏的原则：快速融化

细胞快速融化必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。实验前准备将水浴锅提前预热至37℃。细胞实验室进行常规消毒，用75％酒精擦拭紫外线照射40min的超净工作台台面，保证无菌。在超净工作台中按次序摆放

大鼠星型胶质细胞培养胰酶消化法

材料与仪器SD大鼠苯巴（匕匕）妥解剖液胰蛋白酶 Dnase DM培养液离心管培养箱手术器材步骤一、取14.5d SD大鼠一只。二、苯巴（匕匕）妥0.5 ml 腹腔注射，待麻醉后置于手术台上，酒精棉球消毒皮肤，开腹取出子宫（约12-14个），放入解剖液中，剖开子宫，取出胚胎，放入解剖液中，在耳眼之

细胞培养常见问题及解答

1.如何选用特殊细胞系培养基？培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，首先选MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养是一个好的开始。2.何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。

细胞冻存相关实验操作

一、怎样冻存动物细胞?一个实验室得到一个新的细胞株后，首先要把该细胞株培养扩增后冻存起来。细胞冻存首先可以在由于污染等情况丢失细胞时有备份可用，另外几乎所有细胞在培养传代的过程中发生一定程度的变异，为了保持实验结果的一致，一般细胞在培养几十代以后就不能再使用了，需要将冻存的，传代较少的细胞化冻

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