一、移液器部件说明

二、移液器操作步骤

1、量程设定

对可调式移液器，通常在10%~100%量程范围内操作，最佳移液容量是35%~100%量程范围，此时受操作技巧的影响更小，能更好保障移液的精准性和精度。例如，要移取600uL的液体，选择100~1000uL的可调式移液器，而非500~5000uL的。

量程调节：当由小量程调节至大量程时，朝所需量程方向连贯旋转，旋转到达超过所需量程1/3圈处再回调至所需量程。当由大量程调节至小量程时，直接连贯旋转至所需量程。

2、安装吸头

安装方法：将移液器下端垂直插入吸头，左右转动，上紧即可。

注意用力不可过猛，否则会导致内部零部件松散，从而影响其密封性，甚至会导致调整刻度的旋钮卡死或造成移液器套柄弯曲。

3、润洗吸头

移取有机溶剂或高挥发性液体时，挥发性气体会在套筒室内形成负压，导致漏液。润洗吸头4~6次，使套筒室内的气体达到饱和，负压自动消失，可有效防止漏液。但当样品温度很高或者很低时，不要润洗吸头。

4、吸液

吸头浸入角度：吸液时尽量保持垂直状态，倾斜角度不能超过20°。

吸头浸入深度：

· 0.1~10uL：1~2mm

· 10~200uL：2~3mm

· 200~2000uL：3~6mm

· Over2000uL：6~10mm

吸头浸入时间：吸液后在液面中保持一秒钟再将吸头平缓移开，这对于大容量移液器或者吸取粘性样品尤为重要。

吸液速度：匀速连贯移液，控制好移液速度，太快会造成喷液，液体或者气雾冲入移液器内部，污染活塞等部件。

吸液有两种方式：正向吸液、反向吸液。

（1）正向吸液

①操作方法：操作时将按钮按到第一档吸液，缓慢释放按钮。排液时先按下第一档，打出大部分液体，再按下第二档，确保余液排空。

②适用范围：常规水溶液（如缓冲液、稀释盐溶液）；低粘度液体（如细胞培养基、水）；无挥发性、无起泡风险的液体。

③优点：操作简单快捷，适合日常实验；液体残留少，适合常规体积转移。

④缺点：对高黏度液体（如甘油、DNA溶液）易残留或产生气泡；易挥发液体（如乙醇）可能因吸头内负压导致蒸发损失。

（2）反向吸液

①操作方法：将按钮直接按到第二档，将吸头浸入液面下2~3mm，再慢慢释放，这样会多吸入一些液体。排液时将吸头浸入液面下1~2mm，按到第一档排出，残留液体可以补偿吸头内部的表面吸附。

②适用范围：高黏度液体（如甘油、蛋白质溶液）；易挥发液体（如氯仿、乙醇）；易起泡液体（如含表面活性剂的溶液）；珍贵样品（需避免反复吸排时残留损失）。

③优点：减少气泡生成，提高高黏度液体转移的准确性；避免挥发性液体蒸发导致的体积误差；适合微量或超微量液体的精准转移。

④缺点：操作步骤复杂，需多加练习；会浪费少量液体残留在吸头内；需定期校准移液器，确保过量吸入体积的稳定性。

5、 排液

有4种排液方式：沿内壁排液、在液面上方排液、在液体表面排液、在液面下方排液。

（1）沿内壁排液

①适用场景：黏稠液体、易起泡液体（如蛋白质溶液、含表面活性剂的溶液）或需要精确控制液量的实验。

②操作步骤：将吸头尖端轻贴目标容器的内壁（约45°角倾斜容器）；缓慢按压活塞至第一档，排出液体；保持按压至第二档，使剩余液体完全排出（排放致密或粘稠液体时，停留时间稍长些）；沿内壁缓慢向上滑动吸头，同时松开活塞（避免液体回吸）；移出吸头前确认液滴完全脱离。

（2）在页面上方排液

①适用场景：常规水溶液（如缓冲液、稀释试剂）或对残留无严格要求的实验。

②操作步骤：吸头悬空于液面上方约2~5mm处，保持移液器垂直；匀速按压活塞至第一档，排出大部分液体；继续按压至第二档，排尽剩余液体；直接松开活塞，避免液体回吸。

（3）在液体表面排液

①适用场景：需要避免交叉污染的珍贵样品（如PCR体系）或低黏度液体。

②操作步骤：吸头尖端轻触目标液体的表面（不插入液面下）；缓慢按压活塞至第一档，让液体自然流出（需控制排液速度，防止液体飞溅）；观察液滴完全脱离吸头后，移开移液器。

（4）在液面下方排液

①适用场景：高黏度液体（如甘油、DNA溶液）、易挥发液体（如有机溶剂）或需高精度的微量转移。

②操作步骤：使用反向吸液法，按压活塞至第二档后浸入液体，缓慢松开活塞至初始位置。

将吸头浸入目标液面下1~2 mm处；缓慢按压活塞至第一档排出液体，保持1秒；按压至第二档排尽多余液体（残留量留在吸头内）；移出吸头前松开活塞至初始位置。

6、 卸去吸头

稍用力下按吸头推出器，即可卸掉吸头。如吸头安装过紧，可用手卸除。将吸头丢弃到合适的废物收集器中。

三、注意事项

1、设定移液体积：从大量程调节至小量程为正常调节方法，逆时针旋转刻度即可。从小量程调节至大量程时，应先调至超过设定体积刻度，再回调至设定体积，这样可以保证移液器的精确度。

2、装配移液枪头：将移液枪垂直插入吸头，左右旋转半圈，上紧即可用移液器撞击吸头的方法是非常不可取的，长期这样操作会导致移液器的零件因撞击而松散，从而影响其密封性，严重会导致调节刻度的旋钮卡住。

3、吸液及放液，垂直吸液吸头尖端浸入液面3mm以下，吸液前枪头先在液体中预润洗慢吸慢放，放液时如果量很小则应吸头尖端可靠容器内壁。

4、吸有液体的移液枪不应平放，枪头内的液体很容易污染枪内部而可能导致枪的弹簧生锈。

5、移液枪在每次实验后应将刻度调至最大，让弹簧恢复原型以延长移液枪的使用寿命。

6、吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指，绝不允许突然松开，以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。

7、为获得较高的精度，吸头需预先吸取一次样品溶液，然后再正式移液，因为吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时，吸头内壁会残留一层“液膜”，造成排液量偏小而产生误差。

8、浓度和粘度大的液体，会产生误差，为消除其误差的补偿量，可由试验确定，补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。

9、可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法，来校正取液器，1mL蒸馏水20°C时重0.9982g。所设量程在移液器量程范围内不要将按钮旋出量程，否则会卡住机械装置，损坏了移液器。

10、在设置量程时，请注意：数字清清楚楚在显示窗中，旋转到所需量程。

11、移液器严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体（如浓酸、浓碱、有机物等）。

12、不要用大量程的移液器移取小体积的液体，以免影响准确度。同时，如果需要移取量程范围以外较大量的液体，请使用移液管进行操作。