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建立小鼠免疫抑制模型方法

2023-04-19 10:31:49
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  免疫抑制动物模型的制备(三个制模方法选其一即可,造模后进入第二步实验检测造模是否成功。)

  动物的选取:成年C57BL雄性小鼠,或成年BALB/c雄性小鼠。无论选取哪一类小鼠,都要控制鼠龄、性别和体重,以减少个体差异。

  实验动物的分组:分为实验组、对照组、阳性对照组、阴性对照组、假手术组五组。

  1.  由免疫抑制剂诱发的免疫功能低下模型

  造模原理:免疫抑制剂是对机体的免疫反应具有抑制作用的药物,能抑制与免疫反应有关细胞局枣(T细胞和B细胞等巨噬细胞)的增殖和功能,能降低抗体免疫反应。

  操作方法:

  可以选谨腊消用下列方法之一诱发免疫功能低下模型:

  1.  环磷酰胺 80-100mg/kg 体重,皮下注射,5d。

  2.  氢化可的松 50-100mg/kg 体重,每天皮下注射,6~8d。

  3.  抗淋巴细胞血清 每只鼠腹腔注射抗淋巴细胞血清0.2ml,5~6d

  造模方法评价:以上三种免疫抑制剂方法均可造出相应的模型,但是他们各有利弊,实验时应该根据具体实验情况选择相应的试剂。制备抗淋巴细胞血清法比较复杂,而且抗体成分可能因为分离不彻底而发生交叉反应,但是此法特异性高,不会对动物造成大的损伤,环磷酰胺和氢化可的松会一定程度上造成动物机体的损祥知伤,在研究中,在同等条件下,分别以常规剂量的氢化考的松(HY)和环磷酰胺(CY)复制免疫抑制动物模型,结果发现:HY模型的各项免疫指标均处于高度抑制状态;CY模型在IL-2的产生水平上处于高度抑制状态,在巨噬细胞吞噬率和血清溶菌酶含量方面呈明显抑制作用,但程度上低于HY模型,然而在巨噬细胞吞噬指数和IL-1产生水平上未呈现明显抑制作用;结果提示:用HY可复制出稳定、典型较为理想的免抑制动物模型。

  2.  由辐射诱发的免疫功能低下模型

  操作方法:使用X射线6~8Gy1次照射,4d后可检测。

  造模方法评价:此法制备的动物模型见效快,但是动物存活时间短,对长期实验不利,短期实验使用。

  3.  由强电刺激引起的免疫功能低下模型

  条件允许的话,此法应用成年雄性的NIH小鼠。NIH小鼠对应激性疾病的抵抗力较强。

  操作方法:将多用电针仪(电压U=0.2V,电流强度I=4~5μA,连续密波)正电极连接小鼠阴茎根部腹部皮肤,负电极连接阴茎背侧部皮肤,每天刺激两次,每次刺激10Min,连续刺激10d。

  造模方法评价:此法原理是造成小鼠进入应激状态,使其糖皮质激素分泌增加,导致胸腺萎缩免疫功能低下,故造模过程中应该注意预防应激性疾病如胃溃疡、应激性心脏病以及应激性高血压等的发生。


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