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细胞培养中细胞生长减慢的原因

发布时间:2022-12-23 10:31:05 阅读:11042次 来源:毕合生物

  这种情况可能的原因包括:

  1.由于更换了不同培养液或血清,细胞需要重新适应。

  2.试剂保存不当,培养液中一些细胞生长必需成分如谷氨酰胺或生长因子耗尽或缺乏或已被破坏。

  3.培养物中有少量细菌或真菌污染。

  4.接种细胞起始浓度太低。

  5.细胞已老化。

  6.支原体污染。

  7.检查细胞传代是否频繁;

  8.胰蛋白酶稀释是否有误;

  9.检查共用的设备和试剂、温室和孵箱温度。

  建议解决方法:

  1.比较新培养液与原培养液成分,比较新血清与旧血清支持细胞生长实验。让细胞逐渐适应新培养液。

  2.换入新鲜配制培养液,或补加谷氨酰胺及生长因子。

  3.用无抗生素培养液培养,如发现污染,更换培养物。

  4.血清需要保存在5℃到20℃,培养液需在2-8℃避光保存。含血清完全培养液在2-8℃保存,并在2周内用完。

  5.增加接种细胞起始浓度。

  6.换用新的保种细胞。

  7.要轻轻吹打消化细胞;

  8.隔离培养物,检测支原体。清洁支架和培养箱。如发现支原体污染,更换新的培养物。

  培养细胞死亡的原因:

  常见的可能原因是细胞传代时,消化过度,细胞严重受伤。如经验不足,细胞传代消化时,在显微镜下观察,至细胞变圆、脱壁,加入含血清的培养液,终止消化。其他原因包括长途运输,细胞在不适宜的温度下时间过长;培养液中营养成分消耗殆尽,没有及时换液。如果原来细胞状态较好,换液后细胞死亡,应考虑是培养液及血清的质量。-好事先已证明培养液及血清质量良好。


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