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血清在细胞培养中的作用,实验中应该如何使用血清

发布时间:2022-10-19 10:48:57 阅读:13412次 来源:百度学术

  今天和大家浅谈下细胞培养中血清的主要作用以及无血清培养,细胞培养中用到的血清主要包括:胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)、新生牛血清(newborn calf serum,NCS)、小牛血清(calf serum,CS)、马血清、猪血清、人血清等。

  细胞培养中血清的主要作用如下:

  1、提供基本营养物质:氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等,是细胞生长必须的物质。

  2、提供激素和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质激素(氢化可的松、地塞米松)、类固醇激素(雌二醇、睾酮、孕酮)等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。

  3、提供结合蛋白:结合蛋白作用是携带重要的低分子 量物质,如白蛋白携带维生素、脂肪、以及激素等,转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。

  4、提供促贴附和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。

  5、起到一定的pH缓冲作用。

  6、提供蛋白酶抑制剂,可以与有一些细胞(如内皮细胞、骨髓样细胞)所释放的蛋白酶中和;也可以在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受损伤。

  7、血清蛋白形成了血清的粘度,可以保护细胞免受机械损伤,特别是在悬浮培养搅拌时,粘度起到重要作用。

  8、能与有毒金属和热源物质结合,起到解毒作用。

实验中应该如何使用血清

  使用前处理:大部分血清在使用前必须灭活处理,即56℃30分钟。灭活的目的是去除血清中的补体成分,避免补体对细胞产生毒性作用。血清经过灭活也会损失一些对细胞有利的成分,如生长因子,因此也有人提出血清不经灭活直接用于培养,这样做的前提是确认血清中不含补体成分。对于一些品质高的胎牛血清和新牛血清可以考虑不经灭活直接用于细胞培养。

  储存条件:血清一般储存于-20℃,同时应避免反复冻融。购买大包装的血清后,首先要灭活处理,然后分装成小包装,储存于-20℃,使用前融化。融化时最好现置于4℃。融化后的血清在4℃不宜长时间存放,应尽快使用。

  使用浓度:自从有了合成培养基,血清就是作为一种添加成分与合成培养基混合使用,使用浓度一般为5-20%,最常用是10%。过多血清容易使培养中的细胞发生变化,特别是一些二倍体的无限细胞系,迅速生长之后容易发生恶性转化。 采购血清时,最好先从供应商处索取样品进行试验,选定一批后就要保留足够使用6个月至1年的量,直至用另一批经过预先试验的样品代替。

本文链接:https://www.zjby-biotech.com/news/hyzx/1689.html

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