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为什么会引起细胞空泡化,是因为细胞状态差吗

2023-04-27 10:35:37
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  一、细胞空泡化是什么?

  细胞质空泡化(cylasmic vacuolization)是2019年公布的感染病学名词。变性细胞的胞质、胞核内出现大小不一的空泡(水泡),细胞呈蜂窝状或网状。变性严重的细胞,胞质内小空泡相互融合成大空泡,细胞核悬于中央,或被挤于一侧,细胞形体显著肿大,胞质空白,外形如气球状。

  胞质空泡化可以是可逆的,也可以是不可逆的。可逆的胞质空泡化通常只是在暴露于诱导剂后能观察到,这种胞质空泡化可以引起细胞状态的改变或者细胞周期停滞。而不可逆的胞质空泡化会导致细胞死亡,许多自然或者人工合成的化合物以及被细菌或者病毒感染后均会出现不可逆的胞质空泡化,因此出现这种情况,细胞便不可再用于后续的实验中。

  二、细胞空泡化的原因有哪些?

  1、细胞老化

  原代细胞培养的过程中,随着传代次数的增加,部分细胞进入终末分化状态,丧失分裂能力,随之空泡化而死亡;永生化的细胞系,当细胞传代次数过多时,也会出现老化的现象。

  2、渗透压及pH值

  当细胞培养基渗透压或pH改变,或培养基的pH值与细胞正常所需pH值差别太大等情况时,细胞生长收到刺激,容易发生空泡化。

  3、胰酶消化

  当胰酶消化时间过长,会导致细胞损伤;或者在消化过程中,过度吹打、吹打时产生大量气泡,都容易诱发细胞空泡的产生。

  4、细胞代谢

  在细胞培养过程中,血清质量/浓度、药物或外界刺激等均可导致内质网应激,从而产生空泡。

  5、细胞自噬

  当细胞缺乏营养处于饥饿状态,也会自噬从而产生空泡,但是自噬小体仅能在电镜下观察到。

  6、支原体/病毒污染

  支原体严重污染时,会导致细胞状态变差,空泡化,细胞膜上也会出现小黑点附着;病毒感染也可能会导致空泡的产生。

  三、那遇到细胞空泡化我们应该如何解决?

  1、细胞老化,可以通过复苏代数靠的细胞进行培养。

  2、培养基渗透压及pH值,可以通过更换合适的培养基,调整到合适的渗透压及pH值,再进行培养。

  3、在传代时,要选用合适浓度的胰酶和选取适当的消化时间进行消化,在操作时要避免吹打过度产生大量气泡。

  4、要保,证细胞培养所需的营养充足,可以通过增加血清浓度和在培养基中加入谷氨酰氨解决。

  5、尽量使用质量好和渠道正规的胎牛血清,因为这样的血清营养丰富且外源刺激因子少,可以有效地避免出现这类问题。

  6、在细胞培养时要严格进行无菌操作,注意操作规范,减少污染。定期检测细胞是否存在支原体污染的情况,如果存在支原体污染需及时清除,避免影响细胞状态。

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