旷场实验(OFT)又称开箱实验和旷场实验，是评价实验啮齿动物运动功能和焦虑状态的经典行为学方法，广泛应用于精神神经药理学和神经行为学的基础研究。其原理是基于啮齿类动物具有害怕开阔空间和探索新事物、新环境的天性，所以它们在开阔空间的活动是恐布症。一般认为，记录的开放场活动前10 ~ 20分钟主要是询问活动，后30 ~ 40分钟主要反映自发活动，此时实验动物对开放箱事先并不熟悉。田间实验受多种因素影响，如动物遗传变异、性别、实验环境、昼夜节律、发情周期等。

　　为了研究实验条件对旷场实验主要指标的影响，我们研究了不同性别、品系(昆明种、C57BL/6、BALB/C)小鼠在不同测试时间(早晚)的表现，深入探讨了品系、性别、生物节律对小鼠旷场实验的影响。

　　仪器设置

　　采用VisuTrack动物行为分析软件，通过计算机对分析系统进行实时监控和分析。

　　该仪器主要由四个40 cm× 40 cm× 40 cm的实验开口箱组成，在箱体顶部的中心位置设置了一个与记录系统相连的摄像头。对小鼠的实时图像进行系统分析，获得小鼠在空旷场地的行为数据。

　　旷场实验

　　实验前，所有品系小鼠在饲养室中进行一周的驯化，在此期间，每天对动物进行5分钟左右的抚摸，以适应实验者的操作。实验开始前30分钟，将小鼠移入测试室进行适应，以保证小鼠的活动在实际测试过程中趋于稳定。测试时间:白天8 ∶ 30 ~ 11 ∶ 30，晚上20 ∶ 30 ~ 23 ∶ 30。实验前，在VisuTrack系统（上海欣软）中选择开阔地模式，设置模式索引，设置记录时间为1h，调整亮度等参数，将小鼠放在开阔地中心，背对操作者，输入“开始”命令，开始实验记录。每次动物实验结束后，将开口箱底部的粪便清除，用500 ml/L的乙醇喷洒开口箱底部并用干净的纱布擦干，以避免之前实验动物的残留气味对本次实验的影响。

　　实验获得实际轨迹数据后，利用VisuTrack系统（上海欣软）对数据进行分析，得出每10分钟距离、总距离、前10分钟进入中心区次数等数据。前10分钟实验反映小鼠在新环境中的探索活动，后40分钟实验反映小鼠的自发活动。

　　研究发现

　　本实验对不同性别的C57BL/6、BALB/C和昆明小鼠在不同时间点(不同昼夜节律)进行了1h的旷场实验，并对其探究行为和自发活动进行了分析。旷场实验是一种通过测量运动活动来研究动物行为的实用方法。旷场实验的设计原则是基于啮齿动物的向性(Thigmotax-is)，指的是未知的、有潜在危险的地方，老鼠不敢张大，从而表现出“贴墙”的特性。一般来说，在旷场实验中，小鼠的水平运动反映了动物的活跃程度，垂直运动反映了动物对新环境的好奇心，粪便的多少反映了动物在新环境中的紧张状态。

　　在不习惯的开箱条件下，前10 ~ 20分钟反映小鼠的探索活动，20 ~ 60分钟反映小鼠的自发活动。60分钟后，小鼠活动量下降并趋于稳定，表现出明显的昼夜活动。在人类漫长的培育过程中，实验用小鼠被分为瑞士、ICR、BALB/C、C57BL/6等几个品系。其中，C57BL/6和BALB/C小鼠是科研中常用的两个近交系，但遗传背景差异较大，而昆明小鼠一直是我国唯一的封闭群小鼠，使用最多。以前的研究表明，近亲繁殖的老鼠和封闭的老鼠在基本活动、学习能力和对危险的反应方面。