您的位置:首页>>公司动态>>行业资讯

腺病毒常用的纯化方法(腺病毒需要纯化吗)

发布时间:2022-04-04 10:40:49 阅读:120302次 来源:百度学术

  腺病毒既可以用于体内实验,也可以用于体外实验。如果是用于体外实验,可以选择非纯化的病毒;当用于体内实验时,则需要进行病毒纯化。因为未纯化的病毒液中含有缺损病毒颗粒、细胞碎片、培养基等杂质,这些杂质如果被注入动物体内,会引起宿主显著的免疫学反应。另外,纯化浓缩后的病毒滴度更高,更适合体内注射。

  腺病毒常用的纯化方法为氯化铯或碘克沙醇密度梯度离心法,现以碘克沙醇密度梯度离心法为例,介绍一下腺病毒的纯化浓缩方法:

  1.腺病毒纯化

  (1)配制不同浓度的碘克沙醇;

  (2)取一个超离管,用电动移液器逐层加入不同浓度的碘克沙醇。

  (3)将处理好的病毒液加入到最上层;

  (4)超速离心,48000rpm 2.5h。离心前应将对应的超离管配平,误差控制在0.1g以内。

  2.腺病毒浓缩

  (1)离心完毕后,将超离管底用针头刺破,收集腺病毒所在层至15mL管中;

  (2)将收集的病毒液用冻存缓冲液稀释至体积15mL,然后用0.2μm的滤膜过滤;

  (3)将过滤后的液体置于一个15mL的超滤管中,3500g离心50min,一般离心2-3次达到预定体积;

  (4)将超滤管中剩下的液体反复吹打后吸至病毒储存管中,标明名称和日期。

  (5)将收集起来的病毒涡旋震荡混匀后离心,吸10μl病毒液进行滴度检测。

本文链接:https://www.zjby-biotech.com/news/hyzx/1021.html

注释:[本文仅供阅读]不代表企业及作者的立场,如侵权请联系删除,欢迎分享本文,转载请保留出处!

推荐服务

  • 分子实验

    分子实验平台为广大科研工作提供蛋白、RNA和DNA分子类分析及检测服务···

  • 细胞实验

    细胞实验平台为广大科研工作者提供原代细胞提取、鉴定和培养相关服务···

  • 病理实验

    动物实验平台为广大科研工作者提供动物寄养、疾病模型构建和体内验证···

  • 动物实验

    动物实验平台为广大科研工作者提供科研成果向产品转化的服务,转化方···

  • 精准医疗

    精准医疗平台为癌症患者提供肿瘤移植动物体内服务,模拟患者癌症发展···