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为什么选择腺病毒作为载体(什么情况下选用腺病毒载体)

2022-04-05 10:32:00
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  腺病毒载体能感染分裂细胞和非分裂细胞,适用于体内和体外基因传递,转染效率高,对外源基因瞬时表达量高。但相对于其他病毒载体系统,腺病毒载体在靶细胞中具有相对较高的免疫原性。那么什么情况下,可以优先考虑腺病毒载体?

  1.目的基因较大

  腺病毒较慢病毒和腺相关病毒一个很大的优势在于,载体容量大,可以插入7.5kb以下的基因片段,因此,当待研究的外源基因较大时,可以考虑使用腺病毒载体。

  2.需缩短实验周期

  腺病毒感染效率高,在理想感染条件下,在很多细胞株中的效率可以达到99%,可直接进行后续实验,节约经济成本和时间成本。

  3.目的细胞较难感染,且后续实验不需要建立稳定细胞株

  原代细胞较传代细胞等细胞系难转染,而腺病毒能感染几乎所有的细胞类型,相较于慢病毒和腺相关病毒更适合原代细胞的感染。对于那些慢病毒感染难度较大,且不需要筛选稳定细胞株时,可以选择滴度更高的腺病毒,不仅可以提高感染效率,也能节约成本。

  4.需进行动物实验

  用于动物实验的病毒需具有较高的滴度,才能达到使用小体积注射的目的。目前,慢病毒能达到的较高的有效滴度通常在10E8TU/mL左右,较腺病毒和腺相关病毒更低,而大体积的注射量对于动物是有害的。在这种情况下可以根据实验目的和感染部位选择腺病毒,因为腺病毒的滴度通常可达10E11PFU/mL,在应用动物实验时,注射体积量更小。不仅如此,腺病毒可进行扩增纯化,从而避免重新包装,以节约经济成本和时间成本。

  合适的病毒载体是进行病毒转导实验的关键,下面是病毒载体选择小技巧,供大家参考:

病毒载体选择小技巧

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