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分子实验-间接免疫荧光试验方法

2022-01-13 10:30:14
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  间接免疫荧光试验

  间接荧光是一种双抗体技术。已结合抗原的未标记抗体通过针对未标记抗体的荧光抗球蛋白试剂显现。间接免疫荧光检测用于检测血清和其他体液中的特异性抗体,用于多种传染病的血清诊断。

  方法

  间接免疫荧光是一个两阶段的过程。

  第一阶段:将已知抗原固定在载玻片上。然后将要测试的患者血清涂在载玻片上,然后仔细清洗。如果患者的血清中含有针对该抗原的抗体,它将与载玻片上的抗原结合。

  第二阶段:抗体与抗原的结合可以通过添加荧光染料标记的抗体来检测人IgG,并通过荧光显微镜检查。

  间接免疫荧光测试的第一步是将固定抗原(例如,在细胞或组织中)与未标记的抗体一起孵育,该抗体与抗原结合。仔细清洗后,将荧光抗体(例如荧光标记的抗 IgG)添加到涂片中。第二抗体将与第一抗体结合,抗原-抗体复合物可以在荧光显微镜上观察到。

  间接方法的优点是使用单一标记的抗球蛋白(IgG 抗体)作为“通用试剂”来检测许多不同的特异性抗原-抗体反应。该测试通常比直接免疫荧光测试更敏感。

  间接免疫荧光检测广泛用于:

  检测特异性抗体,用于梅毒、钩端螺旋体病、阿米巴病、弓形虫病和许多其他传染病的血清诊断;

  通过使用对不同免疫球蛋白同种型特异的荧光抗体来识别给定抗体的类别;

  通过使用单克隆抗体和细胞荧光图来识别和计数淋巴细胞亚群;和

  检测自身抗体,例如自身免疫性疾病中的抗核抗体。

  免疫荧光也可用于分析蛋白质、聚糖以及小的生物和非生物分子的分布。免疫荧光已广泛应用于生物学研究和医学研究。

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