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真核生物mRNA的分离纯化原理(目前常用的mRNA的纯化方法)

【实验原理】真核生物的mRNA分子是单顺反子，是编码蛋白质的基因转录产物。真核生物的所有蛋白质归根到底都是mRNA的翻译产物，因此，高质量mRNA的分离纯化是克隆基因、提高cDNA文库构建效率的决定性因素。哺乳动物平均每个细胞含有约1×10-5g RNA，理论上认为每克细胞可分离出5～10mg RNA。其中rRNA为75％～ 85

艾柏森X射线晶体学技术原理(x射线晶体学的基本原理)

技术介绍：X-射线分辨单克隆抗体-抗原复合物是分析单克隆抗体识别表位的最可靠方法，该方法基于对单克隆抗体-抗原共晶体衍射的X-射线束的强度和角度测量，再用生物信息学的方法确定原子坐标，将复合体的三维结构完整可视化。抗原表位分析对抗体人源化改造，抗体亲和力提高，抗体稳定性改造，发现新的功能表位，

HIS标签蛋白没有被洗脱下来原因解析

蛋白挂柱后洗脱不下来主要是因为蛋白和柱子结合能力太强或者洗脱条件太温和，我们可以从以下几方面考虑解决问题。1、洗脱条件太温和：重新摸索洗脱条件，增加缓冲液中咪唑浓度或者适当降低缓冲液pH以确定最佳的洗脱条件或者更、换缓冲液的成分（换成tris-HCl缓冲液）。2、蛋白在柱子中沉淀：适当降低上样量或蛋

什么是噬菌体?噬菌体繁殖的特点有哪些？

噬菌体（phage）是侵袭细菌的病毒，也是赋予宿主菌生物学性状的遗传物质。噬菌体的体积小，其形态有蝌蚪形、微球形和细杆形，以蝌蚪形多见。噬菌体是由核酸和蛋白质构成。蛋白质起着保护核酸的作用，并决定噬菌体的外形和表面特征。其核酸只有一种类型，即DNA或RNA，双链或单链，环状或线状。1.毒性噬菌体指在宿

流式细胞仪的工作原理(流式细胞术的临床应用)

流式细胞仪的工作原理是：将待测细胞经特异性荧光染料染色后放入样品管中，在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。在鞘液的约束下细胞排成单列由流动室的喷嘴喷出，形成细胞柱。流式细胞仪通常以激光作为发光源。经过聚焦整形后的光束，垂直照射在样品流上，被荧光染色的细胞在激光束的照射下，产生散射光和激发荧光。这

肾小球分离、移植培养实验方法

肾小球分离、移植培养SD 大鼠颈椎脱臼法处死，75%乙醇浸泡 1～2 分钟，2 次，置超净台内，打开腹腔取出肾脏剪碎，置含 Hank's 液的无菌培养皿洗涤，置 80 目不锈钢筛网上。用扁平自制小铲轻轻碾磨产物微小组织透过筛网，滤过组织 Hank's 液混合物用吸管吸至120目不锈钢筛网，滤过，去小组织块，滤过

细胞培养的基本条件(细胞培养基的五大基本要求)

现代生物技术均通过细胞作为载体来进行，无论是基因治疗、干细胞、克隆技术都在细胞内进行的。细胞的生长需要一定的营养环境，用于维持细胞生长的营养基质称为培养基，即指所有用于各种目的的体外培养、保存细胞用的物质，就其本意上讲为人工模拟体内生长的营养环境，使细胞在此环境中有生长和繁殖的能力。它是提供细胞

细胞培养全指南(多年实战经验汇总，绝对干货)

本文技术干货：1.细胞培养、传代、冻存和复苏步骤。2.污染防治。3.细胞培养常见问题解答。一、培养、传代、冻存和复苏01准备工作：根据培养细胞的特性，提前准备好适合的培养基和血清等。最好沿用细胞原来的培养条件，以免细胞在新环境下还需要过渡适应。同时，充分了解到细胞的生长特

细胞培养的步骤以及注意事项(简述细胞培养一般步骤)

细胞培养的步骤以及注意事项(简述细胞培养一般步骤)1.细胞复苏将冻存细胞从液氮中取出后，在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。将融化的细胞移入离心管中，加入37oC预热的DMEM完全培养基中（其中胎牛血清约为10%），轻轻吹匀，离心，500g离心2min，弃上清液。加入DMEM完全培养基清洗，弃上清液。加入DMEM完全培养

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