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2022-06-30
肿瘤细胞实验条件
肿瘤细胞实验条件1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好
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2022-06-30
实时荧光定量PCR实验流程及检测方法
实时荧光定量PCR是检测生物样品中DNA、RNA含量的最普遍的方法,通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。荧光定量PCR原理通过荧光染料或荧光标记的特异性探针,对PCR产物进行标记跟踪,通过标准曲线
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2022-06-29
蛋白质转印原理,大分子量蛋白转印的5个技巧
做western blot印迹膜时,较大的蛋白质众所周知是难以处理的。 特别是,您可能很难实现良好的转印效率。 在某些方面,蛋白质难以朝着你想要的方向前进。我们将给5点建议,帮助胶上大分子量蛋白的转印。01牺牲胶的韧性来提高效率低浓度的丙烯酰胺凝胶可能难以操作。一旦手指触摸它就会撕裂?但是,与高
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2022-06-29
RNA提取原理及注意事项有哪些
在分子生物学研究中,有很多实验需要获得目的基因的序列进而确定基因的表达水平,这就需要得到样品中高质量、高纯度的RNA,本文就RNA提取的原理、方法和注意事项进行总结。RNA提取的基本原理裂解过程高浓度蛋白质变性剂的裂解方法,是抽提RNA的首选方案。总RNA的抽提,最重要的是快速裂解细胞膜,而在D
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2022-06-29
细胞计数与存活的测试实验方法有哪些呢?
细胞冷冻与复苏是细胞培养的常规工作,可以解决细胞因为连续继代造成的退变或转化。细胞的原代培养和传代培养以及细胞冻存和复苏后都需要细胞计数。那么细胞计数与存活的测试实验方法有哪些呢?1、原理:(1)计算细胞数目可用血球计数盘或是Coultercounter粒子计数器自动计数。(2)血球计数盘一般有二个c
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2022-06-29
RNA提取有哪些注意事项
目的研究基因的表达和调控时,需要从组织或细胞中分离纯化RNA。RNA质量的高低经常影响RT-PCR、cDNA库构建和Northern Blot等分子生物学实验的成败。主要试剂Trizol是一种新型总RNA抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速破碎细胞,抑制细胞释放出的核酸酶。1. Trizol试剂含有苯酚,具有毒性和刺激性,
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2022-06-28
做细胞实验如何选择培养板
细胞培养板的选择1)细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底(U型和V型)2)培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384、1536孔3)根据材质的不同有Terasaki板和普通细胞培养板。具体选择时根据培养细胞的类型、所需培养体积及不同的实验目的而定U型和V型培养板区别和选择1)贴壁细胞一般用平底培
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2022-06-28
细胞冻存和复苏及细胞如何进行计数存活测试
一般来说,细胞进行转移,最佳的策略是进行低温保存(-70℃~-196℃),而细胞深低温保存的基本原理是:在-70℃以下时,细胞内的酶活性均已停止,即代谢处于完全停止状态,故而可以长期保存。细胞低温保存的关键,在于通过0~20℃阶段的处理过程,在此温度范围内,冰晶呈针状,极易招致细胞的严重损伤。经过前人的长期
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2022-06-28
常用的细胞计数方法,细胞计数方法介绍
常用的细胞计数方法一、原理:细胞悬液制备后,需要计算悬液中所含细胞数量;一般以细胞数/毫升表示。因只有健康的细胞才有活力,接种后能够生长增殖,所以在接种关应先检查一下细胞的活力。二、实验步骤:1. 计数板用96%酒精冲洗计数板后,用干净鹿皮擦净,另擦净盖片一张;把盖片覆在计数板上面,
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