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2022-10-28
流式细胞术检测制备基本流程
流式细胞术检测的对象一般是呈独立状态的悬浮于液体中的细胞,如果要检测组织中的细胞,则必须先将组织制备成单细胞悬液,而后方可进行检测。制备基本流程如下:1.细胞的培养、制备将一定数量的单个细胞收集于1.5mL的EP管中,2400rpm、4℃离心4min,弃上清;加入1xPBS清洗,同等条件进行离心,弃上清。
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2022-10-28
细胞转染有哪些注意事项?
1. 选择合适的转染试剂不同细胞系转染效率通常不同,但细胞系的选择通常是根据实验的需要,因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。每种转染试剂都会提供一些已经成功转染的细胞株列表和文献,通过这些资料可选择最适合实验设计的转染试剂。当然,最适合的是高效、低毒、方便、价优的转染试剂
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2022-10-28
流式细胞术检测细胞周期与细胞凋亡
流式细胞术检测细胞周期:细胞周期:指细胞从前一次分裂结束起到下一次分裂结束为止的活动过程,通常由G0/G1期、S期、G2期和M期组成。G0/G1期:有丝分裂发生,细胞分裂成两个细胞,进入下一个细胞周期,或者进入静止期(G0期),而G0期从DNA含量上无法与G1期区分,细胞开始RNA和蛋白质的合成,但DNA含量仍保持二倍体
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2022-10-27
做好细胞实验的方法(新手入门实验)
细胞复苏是将休眠的细胞重新活化,使之重新生长,进入细胞周期,进而分裂产生子细胞的过程。细胞复苏后,可进入细胞周期,重新获得细胞类型特异的生物学功能。一、实验前准备实验开始前,将无菌培养瓶,15ml离心管、移液管、移液枪、枪头等放入无菌超净工作台,以紫外线照射30min。然后,采用通风机通风3min。以
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2022-10-27
Transwell 细胞迁移/侵袭/实验流程
Transwell小室底层的一张有通透性的膜(一般为聚碳酸酯膜),将其放置于孔板中,小室内称上室,培养板内称下室。由于聚碳酸酯膜有通透性,下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞。应用Transwell可研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。Transwell 细胞迁移/侵袭/实验流程1、细胞共培养:(1
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2022-10-27
贴壁细胞传代培养步骤 (附带注意事项)
传代培养是细胞培养常规保种方法之一,也是几乎所有细胞生物学实验的基础。当细胞在培养瓶中长满后就需要将其稀释,分种成多瓶,细胞才能继续生长。这一过程就叫传代。传代培养可获得大量细胞供实验所需。传代要在严格的无菌条件下进行,每一步都需要认真仔细的无菌操作。悬浮型细胞直接分瓶就可以,而贴壁细胞需经消化
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2022-10-27
人原髓细胞白血病细胞生长慢、状态差怎么办 (HL-60细胞)
HL-60细胞(人原髓细胞白血病细胞)是一株早幼粒细胞,源自一位患有急性粒-单核细胞白血病的36岁白人女性。HL-60细胞自发分化,丁酸盐、次黄嘌呤、佛波醇、肉豆蔻酸、DMSO(1%-1.5%)、放线菌素D和视黄酸均可以促进分化。HL-60细胞表现出吞噬活性,并对趋化刺激有响应;HL-60细胞致癌基因myc表达阳性。图1. HL-60正常生
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2022-10-26
细胞能力实验检测细胞的运动能力(细胞运动能力检测技术原理)
细胞运动能力细胞运动具有粘附性和趋向性。当细胞受到外界刺激时,细胞内的粘附趋化因子激活,根据刺激性质做出不同的反应,细胞在骨架蛋白的作用下细胞伸出伪足,会在支撑物上反复的粘附和脱离,向刺激点或者远离刺激点运动。不同的刺激条件下会有不同的反应,根据细胞对不同刺激的反应,一般使用细胞划痕实验、细
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2022-10-26
组织样本的处理酶解消化法
酶解消化法:原理:利用酶(主要是胶原酶和蛋白酶)破坏组织间的胶原纤维、弹性纤维等、水解组织细胞的紧密连接结构的蛋白质和粘多糖物质以将实体组织分散为单个细胞的方法。应用:既可用于普通单层的传代细胞也适合致密的组织样本,如上皮、肝、肾等或含有大量结缔组织的肿瘤----食管癌、乳腺癌、皮肤癌等。
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