HL-60细胞(人原髓细胞白血病细胞)是一株早幼粒细胞，源自一位患有急性粒-单核细胞白血病的36岁白人女性。HL-60细胞自发分化，丁酸盐、次黄嘌呤、佛波醇、肉豆蔻酸、DMSO(1%-1.5%)、放线菌素D和视黄酸均可以促进分化。HL-60细胞表现出吞噬活性，并对趋化刺激有响应；HL-60细胞致癌基因myc表达阳性。

　　图1. HL-60正常生长图片

　　养过HL-60的老师都知道，要想将这个细胞养好并不容易，细胞生长慢、状态差是较常遇见的问题，今天小普教您如何解决并预防。

　　解决方法

　　当细胞传代后生长速度慢且状态不佳时，可竖着培养直到培养基变黄，待细胞密度起来后，状态会有所好转。

　　同时，若HL-60细胞状态很差，可采用半换液的方式：

　　以T25瓶子为例，瓶子里有5mL培养基，竖起瓶子静置一段时间（竖瓶前拍拍瓶子，让轻贴底部的细胞团浮起来），待细胞沉底（肉眼观察细胞沉底情况），小心吸出2.5mL的培养基，转移到离心管，离心1000rpm 3~5min，用2.5mL新鲜培养基重悬后再放回原瓶。

　　图2. HL-60处理前（左）HL-60处理后（右）

　　图片由客户提供，仅供学习参考

预防方法

　　要想将HL-60细胞养的更好，不仅要学会解决问题的方法，更要懂得如何预防。小普将从以下五点教您如何预防此类问题的出现：

　　1、HL-60细胞在高密度下状态比较好，细胞状态好时会吸收一些细胞碎片；

　　2、低密度时细胞状态很差，传代比例要控制，当培养密度达到1x106/mL左右时可传代，细胞状态不好时后面传代可以不用离心；

　　3、DMSO会对HL-60刺激分化，建议复苏马上离心去除DMSO；

　　4、悬浮细胞对血清要求高，选用优质血清培养；

　　5、培养过程中尽量不动或少动培养瓶。