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2022-11-08
如何才能把细胞培养好起来(细胞培养的步骤以及注意事项)
一、细胞培养的基本概念(1)基本概念细胞培养:狭义的细胞培养主要是指分离(散)细胞培养,广义的细胞培养还包括单(个)细胞培养又称克隆(clone),是指单个细胞通过有丝分裂形成的细胞群体。一个细胞克隆中的所有细胞均来源于同一个祖先细胞。原代培养:即第一次培养,指将培养物放在体外生长环境中持
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2022-11-08
测定蛋白含量有什么方法(附带步骤)
蛋白的含量的测定方法主要有紫外分光光度法、Lowry法、BCA法等。紫外分光光度法原理蛋白质中的酪氨酸和色氨酸残基的苯环在275~280mm有一紫外吸收峰。在一定浓度范围内,其在280mm的吸光度与蛋白浓度成正比。方法取适量蛋白溶液(约3.5ml),置于光径为1cm的石英比色杯、用与溶解蛋白的缓冲液相同的
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2022-11-08
蛋白样品制备常见方法
蛋白样品的制备是蛋白质组研究的第一步,无论后续采用怎样的分离或鉴定手段,样品制备都是关键步骤。因此,为了完全分析所有的细胞内蛋白,组织与细胞必须进行有效的破碎。本文在此介绍几种较为常见的方法。变性条件——SDS LB直接裂解用常温或者高温预热过(预热更有利于阻止蛋白水解或者磷酸酶去磷酸化,但容
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2022-11-08
细胞成团了如何处理?怎么避免
细胞成团的原因有哪些?1.消化的过程过于粗暴,吹打太用力,消化过久,消化液太强或有毒性等会导致细胞死亡。细胞死亡后会释放出DNA,缠绕其他细胞,形成黏性的细胞团。2、细胞离心速度过大或时间太长,也容易造成细胞抱团。3、消化不完全的时候,细胞和细胞之间的连接没有分开;消化过度的时候,圆形的细胞
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2022-11-07
细胞培养怎么避免污染,细胞原代培养的基本步骤
说到细胞培养技术,大家应该并不陌生,它贯穿于细胞检测实验,是决定实验成败的基础因素。细胞培养是指从体内组织取出细胞摹拟体内出现环境,在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下,使期生长繁殖,并维持其结构和功能的一种培养技术,它在细胞学、遗传学、病毒学、免疫学的研究和应用中发挥重要作用。细胞培养
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2022-11-07
细胞复苏实验步骤
细胞复苏的原则:快速融化必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。实验前准备将水浴锅提前预热至37℃。细胞实验室进行常规消毒,用75%酒精擦拭紫外线照射40min的超净工作台台面,保证无菌。在超净工
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2022-11-07
细胞铺板怎么铺均匀
做细胞生物学实验,细胞铺板大概是我们最常见的一个实验。但有时候铺得不是很均匀:下面为大家分享几点经验。1、尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶润洗一遍(25cm2培养瓶或6孔板),弃掉胰酶,37度消化2-3分钟或室温消化5min左右,镜下观察是否细胞消化较为分散。
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2022-11-06
常见的细胞污染类型有哪些
污染来源:化学性、物理性、生物性、细胞交叉。凡混入细胞培养环境中对细胞存在有害的成分和造成细胞不纯的异物都应视为污染,细胞污染不能完全被消除,但能减少其发生的频率和后果的严重性。1、化学性污染污染来源:对细胞有毒性的或对细胞产生刺激的化学物质:培养介质中未纯化的物质、试剂、水、血清、生
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2022-11-06
怎么避免细胞污染(小白避免细胞污染方法)
无论新人还是熟手,细胞污染都是必须要面对的,那对于细胞污染,我觉得最好的措施就是预防为主,因为细胞一旦污染,想救是非常困难的,即便救活,细胞状态也会差很多。常规操作不再赘述,主要安利以下内容:1. 仔细阅读所在实验室的细胞室综合管理制度,严格遵守制度。2. 细胞室室内灭菌可以交
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