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怎么避免细胞污染(小白避免细胞污染方法)

发布时间:2022-11-06 10:40:29 阅读:1662次 来源:网络

  无论新人还是熟手,细胞污染都是必须要面对的,那对于细胞污染,我觉得最好的措施就是预防为主,因为细胞一旦污染,想救是非常困难的,即便救活,细胞状态也会差很多。

  常规操作不再赘述,主要安利以下内容:

  1.  仔细阅读所在实验室的细胞室综合管理制度,严格遵守制度。

  2.  细胞室室内灭菌可以交叉进行,熏蒸、臭氧、紫外、新洁尔灭。

  3.  根据细胞室空间,限制同时进入人数。

  4.  超净工作台使用前后,紫外灯照射灭菌。使用前、后需用酒精棉球擦拭工作区消毒(小窍门:超净台使用完毕后,可以用酒精喷洒桌面,再用抽纸擦干净,比用酒精棉球干净多喽!使用前不建议这种方法擦拭)。物品放入超净台前均应酒精喷洒消毒,超净台内严禁堆放过多物品,以免影响风路平衡。

  5.  水浴锅使用完毕后及时将水倒掉,并保持锅内干燥。常用水浴锅时,每周将水浴锅中的水至少煮沸一次,以防细菌滋生。

  6.  从培养箱取放细胞前,用酒精清洁双手(或手套),尽量缩短开门时间和减少开门次数。培养瓶放入培养箱前,用酒精消毒表面,并稍等至酒精挥发后再放入,以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。

  7.  培养箱用水每周更换一次,更换前托盘用酒精擦拭、紫外灯照射30分钟杀菌。

  8.  灭完菌枪头,烘箱烘干后存放,保质期1周。逾期需重新灭菌使用。

  9.  培养液、胰酶、PBS等试剂尽量不和别人共用,应单独分装使用,以免交叉污染,也便污染后自查原因。

  10.在使用0.22μm的微孔滤膜过滤自配溶液时,注意无菌操作规范,以防滤液污染。特殊情况可检菌安全后使用。

  11.除特殊要求外,建议培养基中添加双抗,算是送给细胞的守护神。

  12.防护服、口罩、手套缺一不可。隔壁细胞室负责人是韩国回来的博士,让学生只戴手套操作,于是经常听他们说细胞挂了。

  13.操作前,准备好所有实验所需物品,以减少走动;物品需有序摆放在超净台触手可及的地方,同时空留足够操作空间。

  14.操作时,试剂不用尽量及时盖上盖子,移至操作区外围,尽量不要从开口容器上经过。

  15.使用移液枪时,将容器倾斜以便于移液,切勿将枪杆碰触瓶口及内壁。一旦发生倒吸情况,要及时用酒精棉球擦拭,以免液体残留导致细菌滋生。

  16.先取试剂、耗材,再取移液枪、安装枪头。很多人习惯先安装枪头,然后去

  拿试剂、耗材,殊不知无意间枪头已经触碰其他地方导致污染。

  17.向废液缸打废液时,需轻柔,以免造成水花四溅,污染枪头、枪体。实验结束,及时倒掉废液缸垃圾,冲洗之后喷洒酒精,放入超净台紫外照射杀菌。

  18.培养基滴在桌面时要及时用酒精棉球擦拭,切记不要等实验做完再处理。因为那样,你的台面上就会永久留下一个印记,对于强迫症的人来说,不!能!接!受!!!!

  19.冻存细胞时冻存管盖子需拧紧。复苏细胞时,从液氮罐取出冻存管,轻拧盖子,以确认盖子是否拧紧。镊子夹住冻存管盖子与管体交界处,在37度水浴锅中快速解冻,水面不可超过冻存管盖沿;不建议直接扔进水中,以免水渗入造成污染。

  20.一旦污染,及时处理,不到不得已不建议施救;查找原因,防止再犯。

  总的来说,防患未然比亡羊补牢强得多。操作过程中对于模糊不清的,宁愿认为是有菌的弃掉,也不要心存侥幸!


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